柔韧丝素基凝胶的快速制备及其性能研究

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水凝胶是一类重要的生物材料,其中,丝素蛋白(SF)水凝胶在药物控释、体外细胞培养和组织工程等生物医学领域已取得了重大进展。然而,丝素基水凝胶目前还存在着制备流程长、过程繁杂、韧性差等一系列问题。因此,制备一种高效短流程且具有优异生物学性能、韧性和体内外降解的生物医用水凝胶成为迫切需要。本文以CaCl2-Fa溶解体系溶解丝素纤维,在此基础上引入透明质酸(HA),制备出新型丝素水凝胶,研究了丝素基水凝胶的制备条件与结构和性能之间的关系,通过体外细胞实验研究了该水凝胶的细胞相容性。
  首先,以CaCl2-Fa溶解体系溶解丝素纤维制备出丝素水凝胶,系统地研究了该凝胶的结构与理化性能。结果表明,CaCl2-Fa溶解体系可高效快速地制备水凝胶;丝素浓度越高,凝胶成型时间缩短,成型性好;凝胶以无规结构和β-折叠结构为主,内部为致密的孔结构,孔径仅在几十纳米到几百纳米之间;随丝素浓度升高,压缩后发生形变所需应力及杨氏模量均增大,丝素浓度为15.0wt%凝胶的平均杨氏模量可达到2.21±0.03MPa,形变量为80%时的平均压缩应力达到1.55±0.25MPa。
  其次,为改善CaCl2-Fa丝素水凝胶的柔韧性,在SF凝胶的基础上,引入HA制备出不同比例的SF/HA共混凝胶,并系统地研究了共混凝胶的结构和理化性能。结果表明,SF/HA共混凝胶的孔径约为50~100μm,孔与孔之间及孔壁上有微纳米纤维附着;共混凝胶以无规结构和β-折叠结构为主,且β-折叠含量略高于SF凝胶;共混凝胶具有强吸水性,其吸水能力是自身重量的1000倍以上(SF/HA=60/40吸水率约为1250%);共混凝胶具有良好的韧性,弯曲打结而凝胶不被破坏,对其施加外力,撤去外力后凝胶可恢复至初始状态;共混凝胶(SF/HA=60/40)的杨氏模量为0.42±0.07MPa,形变量为80%时的平均应力仅为0.37±0.03MPa;共混凝胶的降解速率可调,其中,SF/HA=70/30凝胶在胶原酶溶液中降解21d后质量剩余率约为65%;成纤维细胞在共混凝胶上可粘附增殖,具有良好的细胞相容性。
  通过本文的研究,提出了一种高效短流程制备柔韧丝素基凝胶的方法,该凝胶具有良好的细胞相容性且降解速率可调,为丝素蛋白水凝胶在生物领域的应用提供了理论基础。
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