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乳腺癌是女性最为常见的恶性肿瘤,也是肿瘤相关死亡的主要原因之一。雌激素受体(ER；本文特指ER-α66)与乳腺癌生物学行为密切相关,是一个重要的诊断和预测因子。乳腺癌约70%为ER阳性,30%为阴性。ER阴性乳腺癌患者预后通常不佳,无病生存期和总生存期均比ER阳性患者短。尽管目前针对雌激素和雌激索受体的内分泌治疗取得了很大进展,在ER阳性患者中获得了较好的疗效,但是对于ER阴性乳腺癌患者仍然没有有效的治疗靶点。因此,寻找ER阴性乳腺癌的新靶点是当前乳腺癌研究的迫切任务。本课题主要研究了ER阴性乳腺癌细胞中,ER-α36和SOX4在肿瘤生长、转移和对化疗药物反应中的作用,以期为临床治疗提供新靶点。第一部分：ER-α36是ER-a66的异构体,被发现表达于ER阴性乳腺癌组织标本和细胞系。本课题使用免疫组织化学染色检测肿瘤标本中ER-α36的表达,发现ER-α36在ER阴性乳腺癌中高表达,在ER阳性乳腺癌中低表达,但与年龄、Her-2表达、肿瘤大小淋巴结情况以及肿瘤分期等临床病理特征均无统计学差异。我们使用多个发夹结构的方法构建了针对ER-α36的人工microRNA载体,转染细胞获得ER-a36下调的稳定细胞株。我们发现ER-a36下调对细胞生长没有影响,但导致细胞对紫杉醇敏感性显著增高,这一现象可能与JNK通路被抑制有关。ER-α36被抑制后细胞的迁移、侵袭能力明显降低。细胞的这些改变均不依赖雌激素的存在。这些发现提示ER-α36有可能成为ER阴性乳腺癌的治疗靶点。第二部分：SOX4是一种转录因子,已知表达于多种恶性肿瘤细胞,包括乳腺癌。本课题用慢病毒感染细胞获得高表达SOX4的ER阴性乳腺癌细胞株,体外Transwell实验发现细胞迁移、侵袭能力显著提高,利用活体动物荧光成像的方法观察荷瘤小鼠发现过表达SOX4的肿瘤更早发生转移,且发生转移的比例更高。我们观察到过表达SOX4的细胞发生上皮间质化的形态学改变和相应分子表达水平改变。我们还证实了SOX4过表达细胞中CXCR7表达明显上调,抑制CXCR7能消除SOX4相关的迁移、侵袭能力的改变。这说明CXCR7可能是SOX4的下游靶基因,SOX4通过CXCR7控制乳腺癌转移。体内外实验均证明上调SOX4表达后细胞对紫杉醇敏感性增高,提示对SOX4高表达患者应用紫杉醇可能会有较大获益。我们还发现SOX4在部分乳腺癌细胞中能促进细胞生长。