华蟾素注射液对与淋巴管内皮细胞共培养下人肝癌HepG-2细胞的影响

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mahuanchun
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目的:转移是恶性肿瘤的重要生物特性,亦是目前导致癌症患者生存率低的重要原因,寻找高效低毒的抗转移药物具有十分重要的临床意义。华蟾素是我国传统抗肿瘤中药,已广泛应用于临床,但其抗肿瘤机制仍待探讨。目前尚无华蟾素注射液对淋巴道转移影响的相关报道。本文旨在探讨华蟾素注射液对与人淋巴管内皮细胞(HLEC)共培养下HepG-2细胞淋增殖、粘附以及侵袭能力的影响。方法:1.不同浓度华蟾素注射液作用于HepG-2细胞,采用台盼蓝拒染法观察华蟾素注射液对HepG-2细胞增殖的作用;2. HLEC与HepG-2细胞共培养系统下,采用台盼蓝拒染法观察HLEC对HepG-2细胞增殖的影响及不同浓度华蟾素注射液对共培养系统中HepG-2细胞增殖的作用;3. HLEC与HepG-2细胞共培养系统下,采用MTT法观察HLEC对HepG-2细胞异质黏附力的影响,不同浓度华蟾素注射液对HepG-2细胞异质黏附力的影响及对共培养系统中HepG-2细胞异质黏附力的影响;4. HLEC与HepG-2细胞共培养系统下,利用transwell侵袭小室观察HLEC对HepG-2细胞侵袭力的影响及不同浓度华蟾素注射液对共培养系统中HepG-2细胞侵袭力的影响;5.采用蛋白免疫印迹法(Western-blot)分析不同浓度的华蟾素注射液作用后HepG-2细胞VEGF-C、MMP-2、MMP-9蛋白水平的表达;结果:1.对HepG-2细胞的作用(1)华蟾素明显抑制HepG-2细胞增殖(P<0.05),呈浓度依赖性。(2)华蟾素明显抑制HepG-2细胞侵袭(P<0.05),呈浓度依赖性。(3)华蟾素明显抑制HepG-2异质黏附(P<0.05),呈浓度依赖性。(4)华蟾素注射液可以下调HepG-2细胞中VEGF-C、MMP-2、MMP-9蛋白水平的表达,且呈浓度依赖性。2.对共培养系统中HepG-2细胞的作用(1)华蟾素明显抑制共培养系统中HepG-2细胞增殖(P<0.05),有剂量依赖性。(2)华蟾素明显抑制共培养系统中HepG-2细胞侵袭(P<0.05),有剂量依赖性。(3)华蟾素明显抑制共培养系统中HepG-2细胞异质黏附(P<0.05),剂量依赖的方式。3.共培养系统中HepG-2细胞的增殖,侵袭和异质黏附的能力均显著高于单独培养的HepG-2细胞(P<0.05)。结论:HLEC与HepG-2细胞共培养系统中,HLEC可以促进HepG-2细胞的增殖、黏附及侵袭。华蟾素注射液能够抑制单独培养及共培养系统中HepG-2细胞的增殖、黏附及侵袭,并下调VEGF-C、MMP-2、MMP-9蛋白水平的表达。降低HepG-2细胞与HLEC共培养时的增殖和侵袭能力可能是华蟾素注射液抑制肿瘤转移的机制之一。
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