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脑胶质瘤是最常见的颅内肿瘤,约占所有颅内肿瘤的45%左右,死亡率极高。胶质瘤呈浸润性生长,它和正常脑组织没有明显界限,通过手术难以完全切除,对放疗化疗不甚敏感,非常容易复发。化学药物和一般抗肿瘤的中药,因血脑屏障等因素的影响,疗效也不理想,因此脑胶质瘤至今仍是全身肿瘤中预后最差的肿瘤之一。根据胶质瘤恶性程度的不同,现在通常根据世界卫生组织（World Health Organization,WHO）制定的分级系统,将脑胶质瘤分为Ⅰ级（恶性程度最低、预后最好）到Ⅳ级（恶性程度最高、预后最差）。其中WHOⅡ-Ⅳ级:为弥漫性的恶性肿瘤,其中Ⅱ级和Ⅲ级为较低级别胶质瘤（Diffuse lowergrade gliomas,LGGs）,根据异柠檬酸脱氢酶1和2（Isocitrate dehydrogenase 1和2,IDH1、IDH2）的突变以及1p和19q染色体臂的共缺失,可以将较低级别胶质瘤为三个分子亚群:IDH突变和1p/19q染色体共缺失、IDH突变和1p/19q染色体未共缺失、IDH未突变和1p/19q染色体未共缺失。弥漫性低级别胶质瘤患者最终会死于复发。胶质瘤的高复发率是由于其极强的侵袭性和肿瘤细胞与其微环境相互作用介导的耐药性所导致的。肿瘤相关巨噬细胞（Tumor-associated macrophages,TAMs）是肿瘤微环境中的重要成分,是神经胶质瘤进展的重要调节因子。研究表明,TAMs可通过增强免疫抑制和促进增殖、迁移、侵袭和血管生成来支持胶质瘤的生长和进展。而胶质瘤细胞通过建立免疫抑制微环境,使TAMs朝着促肿瘤M2样表型方向发展,并抑制其朝着抗肿瘤的M1样表型方向的发展。目前针对IDH突变的弥漫性低级别胶质瘤中TAMs的研究还不深入,故通过本研究进一步阐释其作用及相关机制。本研究的主要内容和结果如下:1.在已发表的文章中,对选取IDH突变的3个1p/19q染色体共缺失和4个1p/19q染色体非共缺失的弥漫性低级别胶质瘤样本进行单细胞RNA测序技术（Single-cell RNA sequencing technology,sc RNA-seq）分析,进而从单细胞水平上表征出IDH突变的弥漫性低级别胶质瘤中的肿瘤相关巨噬细胞。通过分析,鉴定出了三种主要类型的细胞,包括肿瘤细胞、少突胶质细胞和巨噬细胞/小胶质细胞。其中709个细胞被鉴定为肿瘤相关巨噬细胞,并与大部分肿瘤细胞明显分隔开。在IDH突变的弥漫性低级别胶质瘤中肿瘤相关巨噬细胞大部分表达M1的相关蛋白,但也有部分细胞共表达M1的相关蛋白和M2的相关蛋白。2.在TCGA数据库中选取两类IDH突变的弥漫性低级别胶质瘤样本,对表达M1相关蛋白和M2相关蛋白的巨噬细胞进行打分,以及后续对获取的样本组织的石蜡切片染色、软件打分及统计学分析。结果发现,M1巨噬细胞特征在1p/19q染色体共缺失和1p/19q染色体非共缺失的弥漫性低级别胶质瘤亚型中差距并不显著,但M2巨噬细胞特征在1p/19q染色体非共缺失的弥漫性低级别胶质瘤亚型中表达含量显著高于1p/19q染色体共缺失的弥漫性低级别胶质瘤亚型。表明了肿瘤相关巨噬细胞在1p/19q染色体非共缺失的亚型中比1p/19q染色体共缺失的亚型更易朝着M2表型的方向极化。3.对从第四军医大学唐都医院获取的若干IDH突变和1p/19q共缺失、IDH突变和1p/19q未共缺失的LGGs样本进行免疫组织化学染色,并进行生物统计学分析。通过对数据库的数据进行分析,选择有表达差异的基因进行验证,对THP-1（人单核细胞细胞系）、HMC3（人小胶质细胞系）进行TGF-β1处理、M-CSF处理以及TGF-β1与M-CSF双处理,后提取RNA,合成c DNA,对M2相关基因进行q RT-PCR分析,并在蛋白水平进行鉴定。研究发现CSF1和TGFB1在1p/19q染色体非共缺失的弥漫性低级别胶质瘤样本中的表达量显著高于1p/19q染色体共缺失的弥漫性低级别胶质瘤,而且1p/19q染色体的共缺失状态和肿瘤相关巨噬细胞的极化之间存在一定的相关性。由肿瘤相关巨噬细胞分泌的M2样细胞因子/趋化因子的表达量在单核细胞中显著上升,但在小胶质细胞中改变并不面明显。表明了M-CSF和TGFβ1可以调节单核细胞,但不能调节小胶质细胞朝向M2样表型变化。而且M-CSF和TGFβ1信号传导可能在调节胶质瘤中的肿瘤相关巨噬细胞的表型中起到关键作用。4.用胶质瘤细胞系进行体外造模,对小鼠原位注射肿瘤细胞,成瘤,进行用两种信号通路抑制剂进行灌胃,后处死小鼠取脑后进行后续分子及病理学分析,通过免疫组织化学、q RT-PCR等手段进行评估。发现单独阻断CSF-1R信号可有效延缓肿瘤的发生发展,当两组抑制剂协同作用时,治疗效果更好,可以显著延长小鼠的生存期。在分子水平染色与量化后也可以得到相同结论。证实了CSF-1R和TGFβ可以协同调节GL261胶质瘤中的肿瘤相关巨噬细胞的表型。综上所述,本研究探索了在IDH突变的弥漫性低级别胶质瘤中,1p/19q染色体共缺失状态对于TAM浸润性的影响,初步揭示了1p/19q染色体共缺失状态对于TAM极化影响的内在机制。M-CSF和TGF-β1或可成为针对TAM靶向胶质瘤治疗的潜在靶点,以及1p/19q共缺失状态或可用作预测对TAM靶向治疗反应的生物标志物,可根据M-CSF和TGF-β二者的基因表达水平对患者预后进行评估并以此为基础开发诊断试剂盒,同时也为后续相关研究提供了理论基础和新思路。