肺癌已成为恶性肿瘤发病和死亡的首要原因,其中以NSCLC发病率和和死亡率最高。化疗是重要的治疗手段,且能防止肿瘤的转移与复发。临床上,治疗NSCLC主要的化疗药物如紫杉醇和多西他赛等,虽然作用较好,但由于体内的广泛分布而存在用药量大、毒副作用大等问题,限制了使用。因此,开发高效低毒的抗癌药物,寻找针对NSCLC的化疗药物及其制剂的研究已成为当前医药学领域亟待攻克的难关。为此,本课题组采用DBaumNC专利新技术制备了新型多西他赛脂质体（Docetaxel liposome,DTX-LP）,作为一个新型的肺靶向制剂,改变了DTX在体内的分布行为,这样一来DTX将会对靶器官和各组织有什么影响或者什么结果,以及是否将产生新的毒性反应,亟需去研究和考察。本文拟在DTX-LP肺靶向下,以多西他赛注射液（Docetaxel injection,DTX-IN）作为参比制剂,考察新型DTX-LP对肺等主要组织器官的毒性影响,阐明毒性反应发生、发展的规律,探讨肺靶向DTX-LP安全性和疗效的生物学评价。首先,DTX-LP的制备及质量评价研究。采用DBaumNC专利新技术制备了具有特定亚微米级尺寸和体外具缓释行为的DTX-LP,以固体形式保存,具有良好的物理和化学稳定性,通过DSC和XRD分析方法表征,于2⁸℃避光密封放置12月,无原料结晶析出。药物含量为6.66±0.18mg/g;水化后DTX-LP的粒径0.72±0.23μm,电位-27.5mV,包封率为90.47±1.65%,热原检查、特殊安全检查（溶血性和刺激性）均符合静脉注射用要求,为进一步体内毒性研究奠定了基础。其次,DTX-LP的肺靶向作用研究。基于红细胞作为载体的理论,探讨了DTX-LP在兔体内的肺靶向作用机制,即可能为粘附于红细胞表面的DTX-LP随血液循环送达肺组织,当红细胞被挤压通过比自身直径更小的肺毛细血管,使DTX-LP脱落而粘附于肺上皮细胞,而实现肺部聚集。采用核素标记放射显影和组织器官浓度法进一步确证了DTX-LP的肺靶向作用。SPECT/CT评价可视化地观测了DTX-LP在肺部的聚集。采用组织器官浓度法的定量研究结果显示,DTX-LP组在肺组织的AUC_0-t是DTX-IN组的16倍;而心和肾组织分别降低至0.51倍和0.55倍,在肝和脾组织分别为1.11和1.04倍。这表明DTX-LP具有较高的肺靶向效率,在其他组织中无显著蓄积作用。第三,DTX-LP的体外细胞毒性实验。采用A549肺癌细胞和MDA-MB-231乳腺癌细胞两种细胞评价了空白脂质体、载药脂质体的体外细胞毒性,其结果表明,空白脂质体无明显的细胞毒性作用;DTX-LP的细胞毒性在一定浓度范围具有剂量依赖性,并且DTX-LP的体外细胞毒性作用显著强于DTX-IN,这表明DTX-LP可增强DTX的体外细胞毒性作用。第四,DTX-LP的急性毒性研究。以急性毒性方法评价了DTX-LP在小鼠和兔体内的安全性。采用最大给药量法（Maximal feasible dose,MFD）显示,DTX-LP在小鼠的最大给药量为9.9mg/kg,该剂量下无动物死亡,毒副反应包括活动减少（困倦、俯卧）,体重减轻,胃肠道反应（食欲下降、腹泻）;系统解剖结果表明,肺有明显组织水肿,脏器系数无显著性差异。DTX-LP在兔体内出现的毒副作用与小鼠相似;血液毒性呈剂量依赖性。在两种实验动物（小鼠和兔）体内急性毒性研究结果表明,毒性靶器官包括肺组织,胃肠道和血液系统。除了拟定的药效学靶器官（肺）,DTX-LP并没有产生更严重的毒性作用。第五,DTX-LP的毒性研究。采用随机设计和对照方法,进一步研究DTX-LP对兔的毒性,同时进行毒代动力学研究。其实验结果表明,DTX-LP血浆中的暴露（AUC）与剂量呈线性相关;DTX-LP降低了DTX的血浆AUC和C_max;多次累积给药后不会改变DTX-LP在兔血浆中的动力学特征。与此同时,采用UPLC-MS/MS方法的体内代谢研究显示,除能检测DTX和已知代谢产物M-2外,在DTX-LP组和DTX-IN组的胆汁和粪便中发现三种新的未知代谢产物Mun-1（相对分子质量821）、Mun-2（相对分子质量837）和Mun-3（相对分子质量819）。根据建立的兔毒性评价分级标准,DTX-LP能够降低同等剂量下DTX-IN严重血液毒性（Ⅲ和Ⅳ级）的发生率以及对心和肾的损害作用,并且对血液、肝和脾的毒性能够恢复;在相同的累积剂量下,不同给药周期（三周一次和每周一次）的比较研究显示,DTX-LP以低剂量多次给药方式可降低骨髓抑制作用。综上所述,本课题组研制的DTX-LP,具有良好物理化学稳定性和生物相容性,以脂质体载体方式将DTX主要靶向送至肺部,而降低了其他组织如血液、心和肾等的分布,显著改善了目前临床应用DTX-IN的全身性系统毒性,为新型制剂DTX-LP全面、系统的安全性评价奠定了较好的基础。