目的:急性胰腺炎(acute pancreatitis简称AP)是临床常见的急性腹痛病症之一。在发病的过程中胰酶在被激活,使胰腺出现自身的的消化、并出现胰腺水肿、胰腺的出血,甚至可以导致胰腺坏死等一系列炎症反应,在疾病的发展过程中可以伴随机体其他器官功能改变,也可以不伴有其他器官功能改变伴。这种疾病起病很急,病情较严重,还有很多并发症,而且伴随有较高死亡率,由于上述种种原因,在临床上,急性胰腺炎也成为一大棘手的问题之一。本课题用L-精氨酸腹腔注射大鼠,建立急性胰腺炎动物模型,并运用张仲景名方大陷胸汤与大柴胡汤的合方对动物模型进行预防、治疗,以此来探讨经方大陷胸汤和大柴胡汤合方在治疗急性胰腺炎疾病的方面所发挥的独特作用,为临床提供可靠的立论依据,为中医治疗急性胰腺炎提供思维和方法。方法:用清洁级Wistar大鼠建立急性胰腺炎动物模型,将大鼠适应性喂养6天,在造模前大鼠将被禁食12小时,但可以自由饮水。实验组的大鼠给予腹腔注射0.574 mmol/L(20%)用生理盐水配置成的L-精氨酸溶液,造模时第一次注射后,中间一小时间隔,然后注射第二次,每次需用3.0 mg/g,制成ANP模型。NS组和中药防治组制模前48h、24h、2h和制模后6h、18h、28h分别用0.9%氯化钠溶液和中药组2m L灌胃,中药治疗组制模后6h、18h、28h用中药组2m L灌胃,制模方法同ANP组。正常对照组注射等量生理盐水。大鼠造模后于3h、12h、24h、36h分批处死,每个时间点每组处死3只。处死前,10%水合氯醛0.3ml/100g腹腔内注射麻醉,新洁尔灭酊消毒后,腹部正中切口入腹,找到腹主动脉位置,抽取大鼠腹主动脉血,然后找到大鼠胰腺位置,切取胰腺组织标本,并放置于多聚甲醛溶液中固定。从多聚甲醛中取出大鼠胰腺,切成0.5×0.5cm组织,用石蜡将组织包埋,包埋的胰腺组织切成3μm的石蜡切片,烤片后进行常规HE病理染色,在光学显微镜下观察胰腺形态及病理变化;全自动生化分析仪上测定血清淀粉酶、脂肪酶含量,ELISA法测定血清AQP1、IL-6、TNF-a含量;按常规免疫组化方法测量大鼠胰腺组织AQP1、IL-6、TNF-a、NF-κB数值。结果:(1)用L-精氨酸腹腔注射大鼠造模成功。(2)正常对照组大鼠与模型组大鼠的脂肪酶(Lipase简称LIP)含量差异明显(P<0.05),有统计学意义;模型组大鼠与生理盐水组大鼠的脂肪酶含量差异不明显(P>0.05),无统计学意义;大陷柴预防组大鼠与模型组、大承气预防组,大承气治疗组大鼠的脂肪酶含量差异明显(P<0.05),有统计学意义;大陷柴治疗组大鼠与模型组、大承气预防组、大承气治疗组大鼠的脂肪酶含量差异明显(P<0.05),有统计学意义;大陷柴预防组大鼠与大陷柴治疗组大鼠的脂肪酶含量差异不明显(P>0.05),无统计学意义;大承气预防组大鼠与模型组、大陷柴预防组、大陷柴治疗组大鼠的脂肪酶含量有明显差异(P<0.05),有统计学意义;大承气治疗组大鼠与模型组、大陷柴预防组、大陷柴治疗组大鼠的脂肪酶含量有明显差异(P<0.05),有统计学意义;大承气预防组与大承气治疗组大鼠的脂肪酶含量无明显差异(P>0.05),无统计学意义。(3)正常对照组大鼠与模型组大鼠的淀粉酶(amylase简称AMY)含量差异明显(P<0.05),有统计学意义;模型组大鼠的淀粉酶含量与生理盐水组大鼠的淀粉酶含量无明显差异(P>0.05),无统计学意义;大陷柴预防组大鼠与模型组、大承气预防组、大承气治疗组大鼠的淀粉酶含量差异明显(P<0.05),有统计学意义;大陷柴治疗组大鼠与模型组、大承气预防组、大承气治疗组大鼠的淀粉酶含量差异明显(P<0.05),有统计学意义;大陷柴预防组大鼠的血清淀粉酶含量与大陷柴治疗组大鼠的血清淀粉酶含量无明显差异(P>0.05),无统计学意义;大承气预防组大鼠的血清脂肪酶含量与模型组、大陷柴预防组、大陷柴治疗组大鼠的血清淀粉酶含量有明显差异(P<0.05),有统计学意义;大承气治疗组大鼠的血清淀粉酶含量与模型组、大陷柴预防组、大陷柴治疗组大鼠的血清淀粉酶含量有明显差异(P<0.05),有统计学意义;大承气预防组的血清淀粉酶含量与大承气治疗组大鼠的血清淀粉酶含量无明显的差异(P>0.05),无统计学意义。(4)ELISA法测定大鼠血清中白介素6(IL-6)的含量:正常对照组大鼠血清中IL-6与模型组大鼠血清中IL-6的含量有明显差异(P<0.05),有统计学意义;模型组大鼠血清中IL-6的含量与生理盐水组大鼠血清中IL-6的含量无明显差异(P>0.05),无统计学意义;大陷柴预防组大鼠血清中IL-6的含量与模型组、大承气预防组、大承气治疗组血清中IL-6的含量有明显差异(P<0.05),有统计学意义;大陷柴治疗组大鼠血清中IL-6的含量与模型组、大承气预防组、大承气治疗组大鼠血清中IL-6的含量有明显差异(P<0.05),有统计学意义;大陷柴预防组大鼠血清中IL-6的含量与大陷柴治疗组大鼠血清中IL-6的含量无明显差异(P>0.05),无统计学意义;大承气预防组大鼠血清中IL-6的含量与模型组、大陷柴预防组、大陷柴治疗组大鼠血清中IL-6的含量存在明显的差异(P<0.05),有统计学意义;大承气治疗组大鼠血清中IL-6的含量与模型组、大陷柴预防组、大陷柴治疗组大鼠血清中IL-6的含量存在明显差异(P<0.05),有统计学意义;大承气预防组大鼠血清中IL-6的含量与大承气治疗组大鼠血清中IL-6的含量存在不明显差异(P>0.05),无统计学意义。(5)ELISA法测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-a)含量:正常对照组大鼠与模型组大鼠的TNF-a含量差异明显(P<0.05),有统计学意义;模型组大鼠与生理盐水组大鼠的TNF-a含量差异不明显(P>0.05),无统计学意义;大陷柴预防组大鼠血清中TNF-a含量与模型组、大承气预防组、大承气治疗组大鼠血清中的TNF-a含量存在明显差异(P<0.05),有统计学意义;大陷柴治疗组大鼠血清中TNF-a含量与模型组、大承气预防组、大承气治疗组大鼠血清中TNF-a的含量存在明显差异(P<0.05),有统计学意义。大陷柴预防组大鼠与大陷柴治疗组大鼠的TNF-a含量差异不明显(P>0.05),无统计学意义。大承气预防组大鼠与模型组、大陷柴预防组、大陷柴治疗组大鼠的TNF-a含量有明显差异(P<0.05),有统计学意义。大承气治疗组大鼠血清中TNF-a的含量与模型组、大陷柴预防组、大陷柴治疗组大鼠血清中的TNF-a含量存在明显差异(P<0.05),有统计学意义。大承气预防组大鼠血清中TNF-a的含量与大承气治疗组大鼠血清中TNF-a的含量存在不明显的差异(P>0.05),无统计学意义。(6)ELISA法测定大鼠血清水通道蛋白1(AQP1)的含量:正常对照组大鼠血清中AQP1的含量与模型组大鼠血清中AQP1的含量存在明显的差异(P<0.05),有统计学意义;模型组大鼠血清中AQP1的含量与生理盐水组大鼠血清中AQP1的含量存在不明显的差异(P>0.05),无统计学意义;大陷柴预防组大鼠血清中AQP1的含量与模型组、大承气预防组、大承气治疗组大鼠血清中AQP1的含量存在明显的差异(P<0.05),有统计学意义;大陷柴治疗组大鼠血清中AQP1的含量与模型组、大承气预防组、大承气治疗组大鼠血清中AQP1的含量存在明显的差异(P<0.05),有统计学意义。大陷柴预防组大鼠血清中AQP1的含量与大陷柴治疗组大鼠血清中AQP1的含量存在不明显的差异(P>0.05),无统计学意义。大承气预防组大鼠血清中AQP1的含量与模型组、大陷柴预防组、大陷柴治疗组大鼠血清中AQP1的含量有明显差异(P<0.05),有统计学意义。大承气治疗组大鼠血清中AQP1的含量与模型组、大陷柴预防组、大陷柴治疗组大鼠血清中AQP1的含量有明显差异(P<0.05),有统计学意义。大承气预防组血清中AQP1的含量与大承气治疗组大鼠血清中AQP1的含量无明显差异(P>0.05),无统计学意义。(7)免疫组化法测定各组大鼠胰腺组织中白介素6(IL-6)的表达:正常对照组大鼠胰腺组织中IL-6与模型组大鼠胰腺组织中IL-6表达存在明显的差异(P<0.05),有统计学意义;模型组大鼠胰腺组织中IL-6与生理盐水组大鼠胰腺组织中IL-6表达存在不明显的差异(P>0.05),无统计学意义;大陷柴预防组大鼠胰腺组织中IL-6与模型组、大承气预防组,大承气治疗组大鼠胰腺组织中IL-6表达存在明显的差异(P<0.05),有统计学意义;大陷柴治疗组大鼠胰腺组织中IL-6与模型组、大承气预防组、大承气治疗组大鼠胰腺组织中IL-6表达存在明显差异(P<0.05),有统计学意义;大陷柴预防组大鼠胰腺组织中IL-6与大陷柴治疗组大鼠胰腺组织中IL-6表达差异不明显(P>0.05),无统计学意义;大承气预防组大鼠胰腺组织中IL-6与模型组、大陷柴预防组、大陷柴治疗组大鼠胰腺组织中IL-6表达有明显差异(P<0.05),有统计学意义;大承气治疗组胰腺组织中IL-6大鼠与模型组、大陷柴预防组、大陷柴治疗组大鼠胰腺组织中IL-6表达有明显差异(P<0.05),有统计学意义;大承气预防组大鼠胰腺组织中IL-6与大承气治疗组大鼠胰腺组织中IL-6表达无明显差异(P>0.05),无统计学意义。(8)免疫组化法测定大鼠胰腺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-a)的表达:正常对照组大鼠胰腺组织中TNF-a与模型组大鼠的胰腺组织中TNF-a表达差异明显(P<0.05),有统计学意义;模型组大鼠胰腺组织中TNF-a与生理盐水组大鼠的胰腺组织中TNF-a表达存在不明显的差异(P>0.05),无统计学意义;大陷柴预防组大鼠胰腺组织中TNF-a与模型组、大承气预防组、大承气治疗组大鼠胰腺组织中TNF-a表达差异明显(P<0.05),有统计学意义;大陷柴治疗组大鼠胰腺组织中TNF-a与模型组、大承气预防组、大承气治疗组大鼠胰腺组织中TNF-a表达差异明显(P<0.05),有统计学意义;大陷柴预防组大鼠胰腺组织中TNF-a与大陷柴治疗组大鼠胰腺组织中TNF-a表达差异不明显(P>0.05),无统计学意义;大承气预防组大鼠胰腺组织中TNF-a与模型组、大陷柴预防组、大陷柴治疗组大鼠胰腺组织中TNF-a表达有明显差异(P<0.05),有统计学意义;大承气治疗组大鼠胰腺组织中TNF-a与模型组、大陷柴预防组、大陷柴治疗组大鼠胰腺组织中TNF-a表达有明显差异(P<0.05),有统计学意义;大承气预防组大鼠胰腺组织中TNF-a与大承气治疗组大鼠胰腺组织中TNF-a表达无明显差异(P>0.05),无统计学意义。(9)免疫组化法测定大鼠胰腺组织中水通道蛋白1(AQP1)的表达:模型组大鼠与生理盐水组大鼠的AQP1表达差异不明显(P>0.05),无统计学意义;大陷柴预防组大鼠与模型组、大承气预防组、大承气治疗组的AQP1表达差异明显(P<0.05),有统计学意义;大陷柴治疗组大鼠与模型组、大承气预防组、大承气治疗组大鼠的AQP1表达差异明显(P<0.05),有统计学意义;大陷柴预防组大鼠胰腺组织中AQP1与模型组、大承气预防组、大承气治疗组大鼠胰腺组织中AQP1表达差异明显(P<0.05),有统计学意义;大陷柴治疗组大鼠胰腺组织中AQP1与模型组、大承气预防组、大承气治疗组大鼠胰腺组织中AQP1表达存在明显的差异(P<0.05),有统计学意义;大陷柴预防组大鼠胰腺组织中AQP1与大陷柴治疗组大鼠胰腺组织中AQP1表达存在不明显的差异(P>0.05),无统计学意义;大承气预防组大鼠胰腺组织中AQP1与模型组、大陷柴预防组、大陷柴治疗组大鼠胰腺组织中AQP1表达存在明显的差异(P<0.05),有统计学意义;大承气治疗组大鼠胰腺组织中AQP1与模型组、大陷柴预防组、大陷柴治疗组大鼠胰腺组织中AQP1表达存在明显的差异(P<0.05),有统计学意义;大承气预防组大鼠胰腺组织中AQP1与大承气治疗组大鼠胰腺组织中AQP1表达存在不明显得差异(P>0.05),无统计学意义。(10)免疫组化法测定大鼠胰腺组织中NF-κB的表达:正常对照组大鼠胰腺组织中NF-κB与模型组大鼠的胰腺组织中NF-κB表达差异明显(P<0.05),有统计学意义;模型组大鼠NF-κB与生理盐水组大鼠的NF-κB表达存在不明显的差异(P>0.05),无统计学意义;大陷柴预防组大鼠胰腺组织中NF-κB与模型组、大承气预防组、大承气治疗组大鼠胰腺组织中NF-κB表达差异明显(P<0.05),有统计学意义;大陷柴治疗组大鼠胰腺组织中NF-κB与模型组、大承气预防组、大承气治疗组大鼠胰腺组织中NF-κB表达差异明显(P<0.05),有统计学意义;大陷柴预防组大鼠胰腺组织中NF-κB与大陷柴治疗组大鼠胰腺组织中NF-κB表达差异不明显(P>0.05),无统计学意义;大承气预防组大鼠胰腺组织中NF-κB与模型组、大陷柴预防组、大陷柴治疗组大鼠胰腺组织中NF-κB表达有明显差异(P<0.05),有统计学意义;大承气治疗组大鼠胰腺组织中NF-κB与模型组、大陷柴预防组、大陷柴治疗组大鼠胰腺组织中NF-κB表达有明显差异(P<0.05),有统计学意义;大承气预防组大鼠胰腺组织中NF-κB与大承气治疗组大鼠胰腺组织中NF-κB表达无明显差异(P>0.05),无统计学意义。结论:(1)大陷柴汤能够明显降低大鼠血清中脂肪酶和淀粉酶的含量。(2)大陷柴汤能够较好降低血清中IL-6和TNF-a含量,继而抑制炎症反应。(3)大陷柴汤能够抑制NF-κB的转录,减轻“瀑布式级联反应”。(4)大陷柴汤能够较好的调节AQP1的表达,进而缓解大鼠胰腺的损伤。(5)大陷柴汤能够较好减轻急性胰腺炎的症状。