参与调控拟南芥叶绿体发育基因的初步功能研究

来源 :中国科学院研究生院 中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:epslon003
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绿色植物的光合作用是地球上唯一大规模地把无机物转变为有机物,把光能转变为化学能的过程。叶绿体是植物进行光合作用的场所。因而,高等植物叶绿体发育与叶绿体功能维持的研究一直倍受人们关注。然而,目前参与高等植物中调控叶绿体发育过程的基因克隆以及这些基因在叶绿体发育过程中的分子机制知之甚少。本论文克隆并初步探讨了2个参与调控拟南芥叶绿体发育基因AtECB1和AtECB2。AtECB1基因编码一个高等植物所特有的,具有类似硫氧还蛋白结构的叶绿体蛋白质。该基因主要在地上部分表达,尤其在14天的幼苗中表达较强,且该基因的表达是受光诱导的。该基因的敲除导致了拟南芥叶绿体中仅有少数片层结构。这些片层不能进一步形成类囊体结构。蛋白质免疫实验表明,突变体中多数光合作用蛋白质复合物的组分缺失。该基因的突变影响了质体转录,翻译和光合作用相关的基因的表达。基于这些结果我们推测,AtECB1可能是叶绿体发育过程中所必需的。而AtECB2基因则编码一个PPR家族的叶绿体蛋白质。该蛋白质具有11个PPR基序;此外,该蛋白质含有E/E+和DYW结构域。因而,AtECB2属于PPR家族中的DYW群。AtECB2敲除突变体表现为白化表型,该突变体中的叶绿体没有正常的类囊体结构,仅存在少量的膜结构。与电镜的结果相一致,蛋白质免疫实验表明突变体中多数光合作用蛋白质复合物的组分缺失。定量RT-PCR结果表明,AtECB2的缺失影响了叶绿体基因的表达。另外,我们对该突变体中的已经报道的34个RNA编辑位点分析发现其中的一个位点accD没有发生编辑。AccD编码异质型乙酰辅酶A羧化酶的羧基转移酶β亚基。而前人的实验表明,该位点的RNA编辑为其所编码的蛋白质活性所必需,且accD的缺失直接影响到植物叶绿体的发育。综合这些数据和本论文的结果表明,AtECB2是质体转录本accD的RNA编辑所必需的特异因子;accD RNA编辑的缺陷可能导致了叶绿体发育的缺陷。
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