研究背景：肿瘤的生长和转移与肿瘤区的血管密切相关，近年来肿瘤血管靶向治疗的研究日趋活跃，VEGF作为作用最强、特异性最高的血管形成因子之一，日益成为研究的热点，以VEGF及VEGFR作为靶点已有许多成功的实验报道，但VEGF和VEGFR作为靶点何者更为有效，目前尚无相关文献报道。 研究目的：探讨VEGF及其受体KDR在实体瘤中的表达差异，观察并比较抗VEGF抗体及抗KDR抗体对人脐静脉内皮细胞及人大肠癌LoVo细胞的生长抑制作用，为确定以VEGF为靶点的抗肿瘤形成策略与以VEGFR为靶点的抗肿瘤形成策略何者更为有效提供依据。 研究方法：利用免疫组化SABC法，以邻片双标记技术对80例人大肠癌组织中的VEGF及KDR的定位与分布进行研究，并通过图像分析系统进行原位定量分析，比较二者的表达量。另将不同浓度的抗VEGF抗体及抗KDR抗体分别加入人脐静脉内皮细胞及LoVo细胞的培养液中，通过MTT法检测培养细胞的活性，计算细胞生长抑制率，进而比较两种抗体对脐静脉内皮细胞及LoVo细胞的作用效果。 研究结果：①VEGF染色阳性物质主要位于肿瘤细胞胞膜及胞浆，KDR染色阳性物质主要位于癌组织及癌组织旁的血管内皮细胞上，VEGF的表达量明显高于KDR的表达量（P＜0.01），大肠癌组织中VEGF和KDR的表达阳性率显著高于正常对照组织（P＜0.01），VEGF和KDR的表达与肿瘤的分化 第一军医大学97硕士生毕业论文 程度及Dukes分期密切相关（P＜0．05卜 与病理分型无关（P＞ 0．05人②抗 VEGF 抗体可明显抑制 LOVo细胞的生长（P t 0刀1）；对脐静脉内皮细胞的生长也有一定抑制作用，但无统计 学意义（P＞o．05）；抗KDR抗体对L。Vo细胞及脐静脉内皮细 胞的生长均有显著性抑制作用（P＜0．of 卜 相同浓度条件下，抗 KDR抗体的抑制作用较抗VEGF抗体更为明显（P＜0刀5）。 研究结论：①VEGF主要表达于大肠癌细胞中，在肿瘤血管 内皮细胞中无表达；KDR主要表达于肿瘤血管内皮细胞，部分 大肠癌细胞中亦有较弱表达，这表明VEGF 主要是通过旁分泌 作用机制诱导肿瘤血管形成，从而促进肿瘤细胞的生长，同时可 能作为一种自分泌生长调节因子直接促进肿瘤细胞的生长。② VEGF和KDR的表达与大肠癌的分化程度和Dukes分期密切相 关，随着肿瘤恶性程度的增加及肿瘤的生长、侵润和转移，VEGF 和KDR的阳性表达率差异显著，提示VEGF和KDR的表达可 反应肿瘤的恶性程度和进展情况，有望作为判断肿瘤预后的指 标。③作为一种可分泌的蛋白，VEGF主要分布于肿瘤细胞中， 而KDR主要位于血管内皮细胞上，这样药物入血后可直接作用 于KDR，而作用于VEGF则需穿透血管；而且，虽然二者在恶 性肿瘤中都有表达，但KDR相比VEGF的表达量明显为低，使 用较小的药量（如抗体）作用于KDR就能达到更好的治疗效果。 故以VEGFR为靶点的抗肿瘤形成治疗策略可能比以VEGF为 靶点的抗肿瘤形成治疗策略为优。