【摘 要】
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花生是世界最重要的油料和经济作物之一,地上开花,地下结果,其花器官的诱导与发育与种子产量紧密相关。MADS-box基因是一类调控植物生长发育的关键基因,散布在整个植物基因组
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花生是世界最重要的油料和经济作物之一,地上开花,地下结果,其花器官的诱导与发育与种子产量紧密相关。MADS-box基因是一类调控植物生长发育的关键基因,散布在整个植物基因组中,编码多种具有重要生物学功能的转录调节因子。在植物中,尤其在花分生组织、花器官及各种营养器官的发育过程中起着重要的作用。本研究以花生品种闽花6号为研究对象,根据已知的花生MADS-box基因保守序列设计简并引物,以同源序列法分离克隆出花生MADS-box基因序列,研究了该基因家族的序列特征及进化关系,为花生高产基因工程的开展奠定基础。本研究根据本实验室前期得到的并已登录Genebank的两条花生MADS-box全长基因的保守序列,并拓展至豆科植物同源序列,设计了3条正向和3条反向引物,组合成5对简并引物,分别以花生各组织混合mRNA逆转录产物为模板扩增目的片段,得到长度分别为520bp、644bp、433bp、557bp、448bp的目的片段,与预期的片段长度相符;将这些目的片段克隆到pGEM-T载体上并转化大肠杆菌,共挑取26个阳性克隆进行测序验证,通过对测序结果进行blast比对,结果表明26条测序片段与已知花生MADS-box基因同源度高达97%,遂将其DNA序列翻译为氨基酸序列,并分析了这26条序列保守结构域,分析表明所得到的序列具有MADS-box基因的两个典型保守结构域,包含部分缺失MADS盒功能域和完整K盒结构域;通过Cluster X 2.0软件聚类分析表明所得到的26条序列之间具有序列多态性。
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