高效液相色谱/蒸发光散射检测法(HPLC/ELSD)测定三七药材及其制剂中三七皂苷R1和人参皂苷Rg1、Rb1的含量

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三七Panax notoginseng(Burk.) F.H.Chen是我国名贵的中药材,具有化瘀止血、活血定痛的功效,被誉为血症良药、伤科要药。三七含三七皂苷、黄酮苷、槲皮素、槲皮苷、β-谷甾醇和氨基酸等。三七的药理活性成分的研究主要集中在三七皂苷成分,具有广泛的药理作用。三七中所含的皂苷与人参相似,为达玛烷系四环三萜类皂苷,水解后主要得到人参三醇和人参二醇。总皂苷含量可达8~12%,主要为人参皂苷Rb1、Rg1、Rg2,并含少量Ra、Rb2、Rd、Re等,另含三七皂苷R1、R2等。三七常用于复方中,对三七皂苷成分分析,成为了评价其药品质量的重要方法。复方丹参滴丸是由丹参、三七和冰片等三味中药,经科学方法提取有效成分精制而成,具有活血化瘀、理气止痛的功效,是治疗心血管疾病的常用药。 高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLCfELSD)为近年来分析测定皂苷类成分的新方法。ELSD为质量型检测器,它对缺乏紫外吸收结构成分的检测有独到之处。本研究工作采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法,对三七药材及复方丹参滴丸中人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1进行了含量测定。在样品预处理中,采用固相萃取技术(SPE)直接对样品水溶液进行净化和富集。研究结果可为含三七制剂的成分测定及质量控制提供有益的借鉴。 一、三七药材中人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1的含量测定 建立三七药材中人参皂苷Rg1和Rb1,三七皂苷R1的含量测定方法。应用高效液相色谱法-蒸发光散射检测器(HPLC—ELSD),结合固相萃取技术对样品水溶液进行预处理,Hypersil NH2柱,流动相为乙腈-异丙醇-10mmol·L-1醋酸铵水溶液(冰醋酸调pH5.0)(75:20:5);流速:0.6ml·min-1,测定了三七药材中人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1的含量。该方法测定此三种成分的线性范围为1.0~10.01μg,加样回收率为95.5~102.5%,日内精密度≤2%、日间精密度≤4%。实验方法简便准确,可为三七的含量测定方法提供借鉴。 二、复方丹参滴丸中人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1的含量测定 建立中药制剂中人参皂苷Rg1和Rb1,三七皂苷R1的含量测定方法。色谱条件同上,对复方丹参滴丸中人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1进行了测定。该方法测定此三种皂苷的线性范围为1.0~10.0μg,加样回收率为95.3~100.4%,日内精密度≤2%、日间精密度≤4%。复方丹参滴丸以水溶性成分为主,待测成分极性亦较大,如何除去其他成分对测定的干扰,是预处理中首要解决的问题。采用固相萃取技术对样品进行预处理,除去干扰成分的效果较好,而且具有样品用量少、操作步骤简单、快捷等特点。此方法简便准确,可为三七制剂含量测定的预处理方法之一。 摘 要 三、使用次数对固相革取柱柱效影响的考察 取同一样品的续滤液,加于5根OSD固相革取柱,进行预处理。然后,用甲醇 10ml对柱进行冲洗,再进行下一轮使用,连续重复使用固相革取柱 8次。以人参皂昔 Rb;为指标,进行测定,考察其峰面积与使用次数之间的关系。使用单因素方差分析对结果进行统计,方差齐性检验:P二0.348>0刀5,认为总体方差相等;不同使用次数测得的峰面积之间卜0刀刃>0刀5,可认为在实验所采用的次数内,不影响测定结果。
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