【摘 要】
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【目的】通过建立哮喘小鼠模型,检测小鼠肺与脾中髓源抑制性细胞(MDSCs)和2型固有淋巴细胞(ILC2s)、Th2细胞及其相关的细胞因子,探讨MDSCs、ILC2s及相关细胞因子在哮喘发生发
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【目的】通过建立哮喘小鼠模型,检测小鼠肺与脾中髓源抑制性细胞(MDSCs)和2型固有淋巴细胞(ILC2s)、Th2细胞及其相关的细胞因子,探讨MDSCs、ILC2s及相关细胞因子在哮喘发生发展中的作用,为哮喘发病机制提供新思路。【方法】将6-8周SPF级BALB/c雄性小鼠随机分为3组(n=6-8):正常组、PBS组和哮喘模型组;卵清蛋白(OVA)建立OVA哮喘小鼠模型,酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清中OVA特异性IgE;HE染色和PAS染色观察小鼠肺组织病理变化;肺泡灌洗液(BALF)进行细胞计数和细胞分类;流式细胞术检测脾和肺组织中2型固有淋巴细胞(ILC2s)、Th1、Th2和MDSCs水平;对MDSCs与ILC2s和Th2进行相关性分析;荧光定量PCR检测肺与脾中细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-13、GATA3、T-bet、IL-10、TGF-βmRNA的表达;免疫组化观察小鼠肺组织IL-10和TGF-β表达。吉西他滨消耗MDSCs后,流式细胞术检测MDSCs耗竭后肺MDSCs的比例和绝对值、Arg1和iNOS的平均荧光强度以及肺组织ILC2s、Th1和Th2比例。【结果】1.哮喘组小鼠较正常和PBS组小鼠有明显气道炎症表现,肺组织HE染色显示炎性细胞明显浸润,气管壁增厚,管腔不规则;在PAS染色中,模型组杯状细胞及粘液分泌明显增多,血清IgE水平增高,肺泡灌洗液中细胞数明显增高,其中嗜酸性粒细胞和中性粒细胞明显增多。2.与正常组和PBS组小鼠相比,哮喘组小鼠肺组织中Th1降低,Th2和ILC2s升高。在肺与脾细胞中哮喘组显示更高的IL-4、GATA3表达和更低的IFN-γ、T-bet表达。同时,哮喘组小鼠肺组织IL-5和IL-13表达增高。3.与正常组和PBS组小鼠相比,哮喘组小鼠脾细胞和肺组织中MDSCs的绝对数量明显升高。哮喘小鼠IL-10在肺组织和脾细胞中表达下调,而TGF-β表达上调。4.在哮喘小鼠的肺组织中G-MDSCs与ILC2s呈正相关。5.吉西他滨耗竭MDSCs后,用药组与哮喘组相比G-MDSCs、iNOS减少,M-MDSCs未见明显减少,而ILC2s和Th2细胞减少,Th1细胞升高。【结论】哮喘小鼠肺组织中ILC2s比例增加,Th1/Th2细胞失衡,G-MDSCs与ILC2s正相关。G-MDSCs减少缓解了哮喘小鼠气道炎症反应,降低了ILC2s和Th2比例;而高表达的G-MDSCs与ILC2s、Th2细胞共同维持、促进哮喘小鼠气道炎症反应。
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