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流式细胞术(Flow Cytometry, FCM)是集现代物理电子技术、激光技术、计算机技术于一体的先进科学技术,可在1秒种内对数万个细胞或生物颗粒同时做有关物理、化学和生物特性的多参数测量,是一种公认的快速、准确、高灵敏度的生物检验方法,在科学研究和现代医疗中有着极其重要的应用。流式细胞仪是以流式细胞术为核心技术的仪器,对我们的科研和生活有着重要的应用和深远意义,被称为实验室的“CT”。可惜的是:中国没有一台国产流式细胞仪,流式细胞技术在中国尚为空白。本论文从流式分析仪的系统设计、调试及质量评价研究;流式鸡红细胞制备工艺、仪器质量控制及细胞脂肪变性研究,微米粒子的大小分布、绝对计数快速分析研究及分选流动室的结构仿真设计四个方面对流式细胞术进行了深入研究。1.按照流式分析的特点进行了激发光源和探测区域的选择,激发光路及分光模块的设计,液流驱动系统和荧光探测模块的设计。以532nm绿激光器为激发光源,采用集成光学系统的流动室、雪崩光电二极管探测模块等构建了流式分析仪验证系统。整个系统实现了细胞绝对计数;光路调试简单,微弱荧光探测强。通过流式细胞仪标准质控微球RCP-30-5A(8peaks)对仪器系统进行测试、评估,通过数据分析处理得出构建系统PE通道荧光峰数为八个,动态范围可达105,灵敏度76MEPE、探测效率Q=0.087,背景噪声B=374MEPE,并给出质量分析数值曲线,科学合理的建立构建系统的质量评估体系。2.流式细胞仪所用微球质控品为国外进口,价格昂贵,增加了仪器的维护、调试费用。试制的流式细胞仪专用鸡红细胞费用低廉,符合流式调试的质控要求;采用试制流式鸡红细胞进行了构建系统的质量控制方法研究,结合构建系统的灵活性,使系统的拓展应用成为可能;构建模型,利用构建系统进行了细胞脂肪变性的研究。3.基于单粒子流式分析的优点对微米聚苯乙烯微球进行快速、定量计数和大小分布研究,完成统计学的分析,实现微米粒子分类计数,为生物医学和环境监测的应用做好铺垫。4.流动室是流式细胞仪的核心部件,对仪器的功能实现具有重大作用。对流动室进行仿真设计研究,给出了鞘液流对样品流的聚焦效果。采用粒子追踪的方法分析聚焦效果;仿真射流微扰细胞流动进行细胞分选,为分选流动室设计提供参考