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目的 观察低氧性肺动脉高压形成过程中大鼠血清和肺组织中fractalkine(FKN)的表达变化,以及低氧对离体培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞和肺微血管内皮细胞合成和分泌FKN的影响,FKN对离体培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响,探讨FKN在低氧性肺动脉高压中的作用。 方法 (1) 将36只雄性SD大鼠随机分为对照组、低氧1天、3天、7天、14天及21天组。以常压低氧复制肺动脉高压模型,右心导管插入法检测平均肺动脉压(mPAP);分别称量大鼠右心室(RV)和左心室加室间隔(LV+S)的重量,计算出右心室肥厚指数RV/(LV+S):图像分析法测量肺小动脉管壁厚度和面积,计算出肺小动脉管壁厚度指标即管壁厚度占血管外径的百分比(WT%)和管壁面积占血管总面积的百分比(WA%);酶联免疫法检测肺组织匀浆和血清FKN浓度,原位杂交和免疫组化法观察肺小动脉FKN mRNA及蛋白的表达,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法观察大鼠肺组织FKN mRNA的表达。(2) 低氧处理离体培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞和肺微血管内皮细胞,采用原位杂交和免疫组化法检测两种细胞中FKN mRNA和蛋白的表达,酶联免疫法检测两种细胞上清液中FKN的浓度。(3) 以不同浓度的FKN刺激常氧或