论文部分内容阅读
第一部分不同强度磁刺激对星形胶质细胞迁移的影响及机制研究实验一：不同强度磁刺激对星形胶质细胞迁移的影响[摘要]目的研究不同强度磁刺激对星形胶质细胞迁移作用的量效关系。方法24只Sprague-Dawley大鼠按刺激强度被随机分为对照组(刺激强度：0Tesla)、0.76T组(刺激强度0.76Tesla)、1.52T组(刺激强度：1.52Tesla)、1.9T组(刺激强度：1.9Tesla),4组的刺激频率为1Hz,刺激量为30脉冲,均采用溴乙锭(EB)注射入脊髓左侧背索复制局灶性的脊髓损伤模型。刺激14天后,处死大鼠,Western-Blot检测GFAP、MAP-2,采用图像分析系统观察GFAP、Brdu和MAP-2的免疫组化表达及脊髓损伤空洞体积的变化。结果随着磁刺激强度的增加,在14天时空洞的体积逐渐缩小,组间差异具有显著性差异(P＜0.05)。在空洞缩小的区域中,可以观察到GFAP的阳性表达,而无Brdu、MAP-2的阳性表达。随着磁刺激强度的增加,GFAP的阳性表达显著增强(P<0.05)。Western-Blot显示：随着磁刺激强度的增加,GFAP的光密度值相应增加,而MAP-2的光密度值没有明显变化,与组化的变化趋势一致。结论刺激频率为1Hz,刺激强度不大于1.9Tesla的条件下,磁刺激可促进星形胶质细胞的迁移,随着刺激强度的增强,星形胶质细胞迁移的能力亦增强。实验二：不同强度磁刺激对星形胶质细胞迁移作用的机制研究[摘要]目的研究不同剂量ERK抑制剂U0126对1Hz磁刺激促进星形胶质细胞迁移作用的影响,以探讨不同强度磁刺激促进星形胶质细胞迁移作用和ERK信号通路的关系,并选择U0126合适的阻滞剂量。方法24只Sprague-Dawley大鼠按U0126剂量被随机分为对照组(Omg/kg U0126, n=6)、低剂量组(0.1mg/kgU0126,n=6)、中剂量组(0.2mg/kg U0126, n= 6)、高剂量组(0.4mg/kg U0126,n=6),4组的刺激参数都为频率1Hz,强度1.52Tesla,刺激量为30脉冲；均采用溴乙锭(EB)注射入脊髓左侧背索复制局灶性的脊髓损伤模型。刺激14天后,处死大鼠,Western-Blot检测GFAP、ERK1/2和MAP-2,采用图像分析系统观察GFAP、ERK1/2和MAP-2的免疫组化表达及脊髓损伤空洞体积的变化。结果随着U0126剂量的增加,在14天时空洞的体积逐渐增大,GFAP和ERK1／2的阳性表达逐渐减弱,与对照组相比具有显著性差异(P<0.05)；并且,GFAP和ERK1／2的阳性表达呈相同的趋势；U0126中剂量组和高剂量组作用则无明显差异(P>0.05)；而病灶区域MAP-2呈阴性表达。Western-Blot显示：随着U0126剂量的增加,ERK1／2逐渐被抑制,0.2mg/kg和0.4mg/kgU0126都可完全抑制ERK1／2的表达,随着ERK逐渐被抑制,GFAP的表达亦逐渐减弱。结论不同剂量的U0126可抑制1Hz磁刺激引起的星形胶质细胞的迁移,0.2mg/kg是较合适的剂量；1.52Tesla,1Hz磁刺激引起的星形胶质细胞迁移与ERK信号通路有关。第二部分不同频率磁刺激对星形胶质细胞迁移的影响及机制研究实验一：不同频率磁刺激对星形胶质细胞迁移的影响[摘要]目的研究不同频率磁刺激对星形胶质细胞迁移作用的量效关系。方法30只Sprague-Dawley大鼠按刺激频率被随机分为对照组(刺激频率：0Hz,强度：1.52Tesla)、1Hz组(刺激频率：1Hz,强度：1.52Tesla)、5Hz组(刺激频率：5Hz,强度：1.52Tesla)、10Hz组(刺激频率：10Hz,强度：1.52Tesla)和20Hz组(刺激频率：20Hz,强度：1.52Tesla),5组的刺激量均为30个脉冲,采用溴乙锭(EB)注射入脊髓左侧背索复制局灶性的脊髓损伤模型。刺激14天后,处死大鼠,Western-Blot检测GFAP、MAP-2,采用图像分析系统观察GFAP、Brdu和MAP-2的表达及脊髓损伤区空洞体积的变化。结果随着磁刺激频率的增加,在第14天时空洞的体积逐渐缩小,组间差异具有显著性差异(P<0.05)。在空洞缩小的区域中,可以观察到GFAP的阳性表达,而无Brdu和MAP-2的阳性表达。随着磁刺激频率的增加,GFAP的阳性表达亦显著增强(P＜0.05)。Western-Blot显示：随着磁刺激频率的增加,GFAP的光密度值相应增加,而MAP-2的光密度值没有明显变化,与组化变化趋势一致。结论刺激强度为1.52 Tesla,刺激频率不大于20Hz的条件下,磁刺激可促进星形胶质细胞的迁移,并随着刺激频率的提高,星形胶质细胞迁移的能力亦增强。实验二：不同频率磁刺激对星形胶质细胞迁移作用的机制研究[摘要]目的研究不同频率磁刺激促进星形胶质细胞迁移过程中ERK1／2所起的作用,以探讨不同频率磁刺激促进星形胶质细胞迁移作用的机制,并选择U0126合适的阻滞剂量。方法24只Sprague-Dawley大鼠按U0126剂量被随机分为对照组(0mg/kg U0126, n= 6)、低剂量组(0.1mg/kg U0126, n=6)、中剂量组(0.2mg/kg U0126, n=6)、高剂量组(0.4mg/kg U0126, n=6)，4组的磁刺激参数均为频率10Hz、强度1.52 Tesla,刺激量30脉冲,均采用溴乙锭(EB)注射入脊髓左侧背索复制局灶性的脊髓损伤模型。刺激14天后,处死大鼠,Western-Blot检测3FAP、ERK1/2和MAP-2,采用图像分析系统观察GFAP、ERK1/2和MAP-2的表达及脊髓损伤空洞体积的变化。结果随着U0126剂量的增加,在第14天时空洞的体积逐渐增大,GFAP和ERK1／2的阳性表达逐渐减弱,与对照组相比具有显著性差异(P<0.05),U0126中剂量组和高剂量组的作用相似无明显差异(P>0.05)。而病灶区域MAP-2呈阴性表达。Western-Blot显示：随着U0126剂量的增加,ERK1／2逐渐被抑制,0.2mg/kg和0.4mg/kgU0126都可完全抑制ERK1／2的表达,随着ERK逐渐被抑制,GFAP的表达亦逐渐减弱。结论不同剂量的U0126可抑制10Hz磁刺激引起的星形胶质细胞的迁移,0.2mg/kg是较合适的剂量；1.52 Tesla,10Hz磁刺激引起的星形胶质细胞迁移与ERK信号通路有关；