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目的:1、研究TRPM4(transient receptor potential M4)信号通道抑制剂—9-菲酚(9-Phenanthrenol)能否影响骨关节炎的进展,通过对软骨细胞的肥大分化的抑制及减少软骨组织的降解,实现缓解骨关节炎的目的;2、研究9-菲酚对软骨细胞凋亡的影响,为能否治疗骨关节炎提供实验依据。方法:1、选取行膝关节置换手术截下的骨关节炎(OA)患者的胫骨平台关节软骨,提取软骨细胞进行培养2、软骨细胞均分为6组,一组不加药作为对照组,其余分别加入不同量的9-菲酚使其浓度分别为5×10-6mol/l、l×10-5 mol/l、2×10-5mol/l、4×10-5 mol/l、8×10-5 mol/l。3、于9-菲酚干预1天培养后细胞进行RT-qPCR检测,检测指标为软骨细胞肥大指标MMP-13、Runx-2及软骨代谢相关指标Aggrecan、COL II;4、于9-菲酚干预1天培养后采用TUNEL染色荧光显微镜检测及Annexin V和7-AAD标记流式细胞仪检测9-菲酚对OA软骨细胞凋亡的影响情况。结果:1、9-菲酚通过抑制TRPM4离子通道对OA软骨细胞肥大分化和代谢影响的RT-qPCR结果:9-菲酚组在8×10-5 mol/l浓度时软骨细胞AGG较空白对照组表达水平显著降低(P<0.05),其余浓度下均有下降趋势。同时9-菲酚组在8×10-5 mol/l浓度时软骨细胞COLII相对照组显著增高(P<0.05)且除5×10-6mol/l组其它组较对照组均有上升趋势,故无法判断9-菲酚对软骨细胞代谢的影响;而软骨细胞肥大指标Runx-2、MMP13的mRNA较对照组表达水平有升高趋势,可见在mRNA水平上,9-菲酚可能促进软骨细胞肥大。2、9-菲酚对OA软骨细胞凋亡的影响:TUNEL染色荧光显微镜检测软骨细胞凋亡率发现,9-菲酚浓度为2×10-5mol/l组较对照组凋亡率明显下降(P<0.05),其它浓度组与对照组比较均无统计学意义,但均有凋亡率下降的趋势。Annexin V和7-AAD标记流式细胞仪检测软骨细胞凋亡率发现,9-菲酚浓度为1×10-5mol/l、2×10-5mol/l、4×10-5mol/l时较对照组凋亡率均有所下降(P<0.05),而在另外两组有下降趋势。结论:1、9-菲酚能促进OA软骨细胞的肥大分化。2、9-菲酚能抑制OA软骨细胞的凋亡,在OA治疗方面具有积极意义。