蜂胶中咖啡酸苯乙酯的提取及应用

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目的意义:咖啡酸苯乙酯作为天然产物——蜂胶的主要活性成分之一,在抗肿瘤、抗氧化、抗炎症、免疫调节等方面表现出独特的生理、药理作用,因此,咖啡酸苯乙酯成为近年来国内外蜂胶活性成分研究的一大热点。本论文旨在对以咖啡酸苯乙酯为主要功效成分的新药研发提供参考。研究内容:作者通过比对国内外大量文献资料,对蜂胶及蜂胶中的咖啡酸苯乙酯的药理学及药效学进行了初步探索。实验中通过测定蜂胶样块的乙醇提取物含量、杂质和蜂蜡含量、碘值、氧化时间、酚类化合物含量及黄酮类化合物定性反应确定了供试蜂胶样块的等级。通过测定蜂胶中咖啡酸苯乙酯的原始含量确定选用来自中国河北的蜂胶样品。确定了从蜂胶中提取中等浓度的咖啡酸苯乙酯的材料和方法,选定了所需的萃取溶剂、反应温度、超声浸提时间、固液倍比柱层析反应参数等实验参数,提出了一种经济适用的从蜂胶中提取咖啡酸苯乙酯的工艺。建立了咖啡酸苯乙酯的反相高效液相色谱测定方法,并完成了其反相高效液相色谱的方法学研究。进行了咖啡酸苯乙酯的抗菌实验,测定其抑菌圈和最低抑菌浓度。对咖啡酸苯乙酯提取样品进行毒理学研究,测得了小白鼠的半数至死剂量。用咖啡酸苯乙酯的提取物制作了胶囊,并对胶囊进行了检测。结论:本实验中设计的提取工艺可以有力的分离出蜂胶中的咖啡酸苯乙酯,咖啡酸苯乙酯成品的含量为48.75%,与原蜂胶样品中咖啡酸苯乙酯的含量2.63%(26.352 mg/g)相比,咖啡酸苯乙酯含量扩大将近20倍,产品得率为2.38%,提取效率为44.2%。由此可见,本实验所设计的工艺路线对从蜂胶中提取中等浓度的咖啡酸苯乙酯完全可行。实验中建立的高效液相色谱测定方法可以准确测定出样品中咖啡酸苯乙酯的含量。咖啡酸苯乙酯提取物具有较强的抗菌活性和较低的毒性。本实验中制备的咖啡酸苯乙酯样品制成的胶囊符合中国药典规定。
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