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石油作为一种战略性能源,给人类的发展带来了巨大的变革。然而,在石油的勘探、开采、运输、储存及生产加工等过程中致使大量的石油进入生态环境,对生态系统和人类的健康构成了极大的威胁和危害。物理和化学方法处理石油污染由于治标不治本而受到限制,微生物修复治理技术因经济、高效、环保且无二次污染等优点已受到广泛的关注。因此,筛选出高效原油降解微生物,研究其降解特性,为进一步开发具有高性能的原油降解微生物提供技术支持。本文取样于长庆油田被原油污染的土壤,从中筛选出能够高效降解原油的微生物,得到如下结果：(1)通过以原油为唯一碳源的富集培养,获得了14株能够利用原油进行生长的细菌,其中有4株(编号分别为105、109、112、178)稳定性比较好,尤其是菌株109号不但稳定性好而且对原油的降解能力最强,所以选取109号菌株开展进一步的实验研究,命名为ODB01。(2)由形态学观察、生理生化试验、16S rDNA序列同源性分析以及系统发育树等结果表明：菌株ODB01为肠杆菌属(Enterobacter sp.)细菌。(3)抗生素药敏试验结果表明：细菌ODB01对红霉素、青霉素、新生霉素、氨苄西林和苯唑西林具有很强的耐药性,而对羧苄西林、氯霉素、卡那霉素、头孢曲拉、头孢呋辛、头孢他啶、哌拉西林和头孢哌酮极其敏感。(4)利用响应曲面法(Box-Behnken)优化原油降解条件为：pH为8.91,NaCl浓度为1.19%,油菌比为1：4.12,温度为36.78℃,原油降解率为34.55%,是优化前的1.44倍。(5)非离子表面活性剂Tween 80和Triton X-100都能够增加细菌ODB01对原油的降解率,其最适表面活性剂浓度均为0.05%,在最适的降解条件以及分别添加0.05%Tween 80和0.05% Triton X-100的情况下,其原油的降解率分别是42.53%和46.10%,相比于没有添加表面活性剂的降解率分别增加了15%和24%。(6)原油降解细菌ODB01的全基因组序列分析表明：该细菌基因组共产生4,534,036 bp, GC含量为54.81%,含4117个CDS,从中初步鉴定出可能与石油烃降解相关的单／双加氧酶基因有27个,这些基因有可能参与原油的降解。