研究背景：肝纤维化是慢性肝损伤后组织进行的自我修复反应，由多种致病因素引起，其持续进展的最终结局为肝硬化，甚至肝癌。肝纤维化的中心环节为肝星状细胞（Hepatic stellate cell，HSC）的活化。研究发现，在肝纤维化时，由NADPH氧化酶（NADPH oxidase，NOX）介导所产生的活性氧簇（Reactive oxygen species，ROS）除了能够直接活化HSC外，还可以介导多种促肝纤维化因子在细胞内的信号转导。因此，通过调节该酶的活性和表达，以降低ROS的产生，从而对各种细胞因子在HSC内的信号转导产生作用，可能是肝纤维化阻止或者逆转的新靶点。吡非尼酮（pirfenidone，PFD）是近年来备受关注的一个具有广谱抗纤维化作用的药物，研究发现PFD可通过多种途径抑制HSC的活化和增殖，进而发挥抗肝纤维化的作用，然而PFD是否通过影响 NOX调节ROS的表达，从而发挥其抗肝纤维化的作用尚不清楚。本研究分为以下两个部分：　　第一部分　　目的：探讨PFD对CCl4所致肝纤维化大鼠模型中NOX表达的影响及其抗氧化机制。方法：50只SD大鼠，雌雄各半，随机分为对照组、模型组、PFD低高剂量组（200mg/kg/d，400mg/kg/d）以及阳性对照组（夹竹桃麻素，Apocynin，APO，20mg/kg/d），每组10只，模型组及各药物组大鼠腹腔注射50％CCl4橄榄油溶液，剂量为1ml/kg，对照组腹腔注射等量的橄榄油，每周两次，连续八周。第六周开始灌胃给予PFD和阳性药物APO，连续21天。末次给药24h后处死大鼠，收集血清和肝组织，检测血清ALT、AST；HE染色观察肝组织病理学变化；检测肝组织中羟脯氨酸（hydroxyproline，Hyp）、MDA及SOD的变化；Western-blotting法检测肝组织NOX1、NOX4蛋白的表达。结果：1）与对照组相比，模型组大鼠体重明显降低（P<0.05），肝指数明显增加（P<0.01），血清AST、ALT显著增加（P<0.01），Hyp含量显著增加（P<0.01），肝组织MDA含量显著上升（P<0.01），SOD活性下降（P<0.05）。经PFD和APO干预后，与模型组比较，药物组肝指数显著降低（P<0.05），血清AST、ALT明显降低（P<0.05），肝组织Hyp含量下降（P<0.05，P<0.01），MDA下降（P<0.05），SOD上升（P<0.05）。2）HE染色结果病理学显示，对照组大鼠肝小叶结构正常，无纤维化增生；模型组大鼠肝小叶结构明显破坏，纤维增生，形成假小叶；药物组大鼠肝小叶结构轻度紊乱，无明显假小叶形成。3）Western-blotting结果表明，模型组NOX1、NOX4蛋白表达与对照组比较显著上调（P<0.01）；药物干预组 NOX1、NOX4蛋白表达较模型组显著下调（P<0.01）。　　第二部分　　目的：探讨PFD对血管紧张素II（Angiotensin II，Ang II）诱导大鼠肝星状细胞（HSC-T6）ROS产生的影响及其相关机制。方法:取对数生长期的HSC-T6细胞，分为以下六组：对照组、Ang II组、PFD低、中、高剂量组（0.2mM，0.4mM，0.8mM）和阳性对照组（APO，20μM）。分别用PFD和APO预处理HSC-T630min后，除对照组外，其他各组加入1μM Ang II刺激。经药物作用24h后，采用2,7-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)探针法检测ROS的生成，Western-blotting检测细胞内NOX1、NOX4蛋白表达。结果：Ang II组细胞内ROS的生成显著高于对照组（P<0.01），PFD低、中、高剂量组（0.2mM，0.4mM，0.8mM）和阳性对照组的ROS的生成均低于Ang II组（P<0.05，P<0.01）且PFD作用呈剂量依赖性。Western-blotting结果显示，Ang II能显著增加HSC-T6细胞中NOX1、NOX4蛋白的表达（P<0.01），PFD和APO干预后，其蛋白表达明显下调（P<0.05，P<0.01）。　　结论：1）PFD对CCl4诱导的大鼠肝纤维化具有保护作用，抑制NOX介导的抗氧化作用可能为其机制之一。2）PFD可通过抑制HSC-T6细胞内NOX的亚基NOX1、NOX4的蛋白表达来减少ROS的产生。