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禽流感是由A型流行性感冒病毒引起的一种禽类烈性传染病,主要在禽类中传播,可通过多种途径传播,临床症状多样,严重影响养禽业发展。特别是高致病性禽流感的流行已对人类的健康构成了威胁,引起了广泛关注。通过推广使用禽流感灭活疫苗,对控制畜禽疫病的流行起了关键作用。为了提高疫苗的免疫效果,需加大研制质量稳定、免疫效果好的高效疫苗。多联多价疫苗免疫一次可以达到防治多种疾病,简化免疫程序的目的,但联苗中的抗原含量和抗原生物活性不能保证,需要研究抗原的浓缩工艺,以高疫苗单位体积内抗原的含量,降低甲醛加量,提高疫苗质量。本研究采用美国Millpore公司的切向流超滤浓缩系统,建立了对重组禽流感病毒(H5N1亚型,Re-5株)抗原进行2-6倍超滤浓缩的方法。结果显示:分别选用截留分子量为5万、10万及30万分子量的超滤膜都可以对禽流感病毒抗原进行浓缩,病毒回收率100﹪、HA和EID50效价同比提高。表明采用切向流超滤技术可以有效对禽流感病毒抗原进行浓缩。用浓缩抗原配制成浓缩油乳剂灭活疫苗对鸡体进行免疫,免疫后对HI抗体进行监测,结果显示鸡体在免疫后10日内开始产生抗体,21-40日达到高峰。浓缩疫苗HI抗体滴度在6㏒ 2-12㏒ 2之间,普通疫苗HI抗体滴度在5㏒ 2-10㏒ 2之间。浓缩疫苗和普通疫苗的免疫效果比较试验表明,免疫后10、14、21、40d,浓缩疫苗诱导产生的HI抗体均高于普通疫苗,抗体消长规律显示浓缩疫苗HI抗体产生稳定,免疫持续期长,免疫应答符合油乳剂灭活疫苗的要求;用禽流感浓缩抗原和新城疫抗原配制油乳剂灭活联苗对鸡体进行免疫,免疫后对HI抗体进行监测,结果显示鸡体在免疫后1周内开始产生抗体,其中禽流感浓缩联苗中禽流感抗体21-40日内达到高峰,最高达到12㏒ 2,新城疫抗体14-40日内达到高峰,最高达到9㏒ 2;禽流感普通联苗中禽流感抗体最高达到11㏒ 2,新城疫抗体最高达到9㏒ 2。抗体消长规律显示浓缩疫苗诱导的禽流感HI抗体均高于普通疫苗,浓缩疫苗HI抗体产生稳定,免疫持续期长,禽流感浓缩抗原对新城疫抗原无干扰现象。免疫应答符合油乳剂灭活疫苗的要。研究表明浓缩疫苗和普通疫苗免疫接种后均引起程度不同的免疫副反应,但浓缩疫苗比普通疫苗的免疫副反应小。