利妥昔单抗对原发性免疫性血小板减少症患者源性树突状细胞功能的影响

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目的:原发性免疫性血小板减少症(Primary immune thrombocytopenia,ITP)曾用名特发性血小板减少性紫癜(Idiopathic thrombocytopenic purpura),临床难治、复发率较高。利妥昔单抗(Rituximab,CD20单抗,美罗华)作为新型治疗手段显示出较好的治疗效果。本研究拟探讨利妥昔单抗对ITP患者源性树突状细胞(dendritic cell,DC)功能的影响,阐述其有效的细胞免疫机制。方法:Ficoll密度梯度离心法分离小剂量利妥昔单抗治疗有效的ITP患者治疗前后的外周血获得单个核细胞(peripheral mononuclear cell,PMNC),与重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)和重组人白介素-4(rhIL-4)在37℃,5%CO2条件下共培养诱导DCs;于第5天加入TNF-α共培养48小时后获得成熟DCs;倒置显微镜观察DCs的形态,流式细胞仪检测DCs表型,酶联免疫吸附法(ELISA法)检测DCs上清液IL-12p70和TGF-β1的浓度。结果:①培养第7d,倒置显微镜下可见治疗后DCs较治疗前DCs细胞膜缺乏典型的树枝状或裙褶状突起,体积较小,核多居中规则。②治疗后DCs的CD80、CD83和CD86阳性表达率分别为(36.41±2.82)%、(30.45±4.61)%和(41.98±4.17)%明显低于治疗前的(55.14±7.30)%、(80.91±7.09)%和(59.03±3.43)%(p<0.05)。③治疗后IL-12p70浓度为(50.17±14.52)Pg·ml-1明显低于治疗前的(66.87±4.29)Pg·ml-1;治疗后TGF-β1为(9.7±0.31) ng·ml-1明显高于治疗前的(2.7±0.36)ng·ml-1(p<0.05).结论:小剂量利妥昔单抗治疗后ITP患者源性的DCs表型及分泌IL-12p70的能力明显降低,分泌TGF-β1能力增高。小剂量利妥昔单抗通过下调DCs的免疫活性可能是治疗ITP有效的另一机制。
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