【摘 要】
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本研究主要是以草生欧文氏菌10025A(Erwinia herbicola)(简称A25)为出发菌株,按照产冰核活性蛋白优化所得的条件发酵培养A25,细菌细胞经收获后,经过一系列操作,如:超声波破碎
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本研究主要是以草生欧文氏菌10025A(Erwinia herbicola)(简称A25)为出发菌株,按照产冰核活性蛋白优化所得的条件发酵培养A25,细菌细胞经收获后,经过一系列操作,如:超声波破碎,差速高速离心,凝胶过滤等操作,最终获得了高纯度的冰核蛋白;用此高纯度的冰核蛋白免疫新西兰兔制取了效价比较高的冰核蛋白免疫抗血清,而且,还成功制备了胶体金标记的羊抗兔二抗,在电镜条件下观察到了A25中的冰核蛋白与细胞膜的结合情况.另外,还对A25的一些培养特性以及环境条件特别是温度变化对其Ⅰ型冰核活性蛋白合成的影响进行了研究.最后通过本实验与国内外的研究结果比较结合后,证实了Ⅰ型活性冰核蛋白活性表达的机理(即其组装模型)以及提出了Ⅰ型冰核蛋白与细胞膜相互结合的方式,并解释了温度变化对Ⅰ型冰核蛋白活性表达影响的原因.
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