FOXO3（又名叉头盒（forkhead）转录因子3a）,属于叉头盒（FOX）超家族中O亚家族的成员。研究表明,FOXO3基因可受PI3k/Akt信号通路调控,通过磷酸化的PI3K激活Akt,导致FOXO3基因磷酸化,使其丧失转录活性,从而防止细胞凋亡。在哺乳动物卵巢中,FOXO3基因可以通过促进卵巢颗粒细胞凋亡来调节卵泡的闭锁及生长,所以,我们推测FOXO3基因可能是导致禽类卵泡闭锁的重要调控因子。因此,本试验以鸡为研究对象,首先利用荧光定量PCR和免疫荧光技术检测FOXO3基因在鸡不同组织以及不同阶段卵泡中的m RNA表达和蛋白表达的差异。其次,在鸡原代卵巢颗粒细胞中,通过干扰技术检测FOXO3基因被干扰后,PI3K/Akt通路下游相关凋亡基因、FOXO3的靶向基因以及三种激素受体基因ERβ、FSHR、LHR的m RNA表达情况;并通过外源添加不同浓度的FOXO3蛋白检测通PI3K/Akt通路下游相关凋亡基因、FOXO3的靶向基因以及三种激素受体基因的m RNA表达情况;最后,通过添加不同浓度的E₂、FSH、LH激素检测鸡卵巢颗粒细胞的增殖情况,并检测FOXO3基因和三种激素受体基因的m RNA表达情况。结果表明:（1）FOXO3基因在鸡不同繁殖组织和各等级卵泡中均有表达,且在等级卵泡中的表达量随卵泡直径的增大而降低。在等级卵泡中,FOXO3基因在F1卵泡中的表达量最低,显著低于其在F2和F3等级卵泡中的表达量（P<0.05）,极显著低于F4和F5中的表达量（P<0.01）,而FOXO3基因在F4和F5卵泡中的表达量差异不显著（P>0.05）;在等级前卵泡中,FOXO3基因在LWF中的表达量极显著低于SYF（P<0.01）,并且与SWF中的表达量差异显著（P>0.05）。（2）在鸡原代卵巢颗粒细胞中干扰FOXO3基因后,PI3K/Akt信号通路下游相关凋亡基因BCL2L11、Bnip3以及FOXO3的靶向基因CDKN1B、FASLG的表达均没有显著变化（P>0.05）,且FSH、E₂、LH的受体基因FSHR、ERβ、LHR的表达量也没有显著变化（P>0.05）。（3）鸡原代卵巢颗粒细胞中外源添加FOXO3蛋白后,FOXO3基因的表达量会发生变化,其中高浓度处理组显著高于低浓度处理组（P<0.05）。Bnip3基因在高浓度处理组中的表达量显著高于其他组（P<0.05）,而在其它不同浓度组中的差异不显著（P>0.05）;CDKN1B基因,在高浓度处理组中差异显著（P<0.05）;而BCL2L11、FASLG基因在不同浓度的FOXO3外源蛋白中表达的差异均不显著（P>0.05）;相关激素受体基因ERβ、FSHR和LHR的表达差异也均不显著（P>0.05）。（4）鸡颗粒细胞中添加不同浓度的E₂、FSH和LH后,造成颗粒细胞发生不同程度的增殖（P<0.05）,添加不同浓度的LH后,颗粒细胞出现凋亡现象;在E₂、FSH处理的颗粒细胞中,高浓度处理组中的颗粒细胞极显著增殖（P<0.01）;在LH处理的颗粒细胞中,颗粒细胞OD值显著下降（P<0.05）。添加不同浓度E₂导致ERβ基因表达量显著上调（P<0.05）,FOXO3基因表达量显著下调（P<0.05）;添加不同浓度的FSH导致FSHR基因表达在处理组中显著高于对照（P<0.05）,而FOXO3基因在对处理组中的表达则显著低于对照组（P<0.05）;添加不同浓度的LH导致LHR基因表达在高浓度处理组中显著上调（P<0.05）,而FOXO3基因在不同浓度处理组中的表达量差异不显著（P>0.05）。综上所述,无论是在鸡不同繁殖组织、卵泡,还是在鸡卵巢颗粒细胞中,FOXO3基因均有所表达,并表现出具有促使鸡颗粒细胞凋亡的功能,但不能直接调控激素受体基因ERβ、FSHR、LHR。因此E₂、FSH、LH与FOXO3之间的在鸡卵泡中的调控关系有待进一步本探究。本试验结果可为更深入的探索FOXO3基因在鸡卵泡发育过程中的调控作用,并揭示鸡卵泡发育差异的分子机制提供参考依据。