苛求芽孢杆菌尿酸酶的结构对其热稳定性的影响

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重组苛求芽孢杆菌(ATCC29604)胞内尿酸酶用于动力学方法测定血清尿酸有显著优势,还有治疗高尿酸血症的药用潜力。本实验室构建N端序列为AERTMFYGKGDV的重组尿酸酶,其米氏常数为(0.22±0.01)mM,初速度法不适合测定其动力参数;此重组尿酸酶在pH7.4的稳定性半衰期约7小时,且四聚体结构不稳定。本文首先建立了重组苛求芽孢杆菌尿酸酶动力学参数的评价方法,考察了不同条件下重组表达的尿酸酶的四聚体结构变化,分析了其单位结构模型的活性中心及其附近静电作用网络,优化此静电网络及N端第1到9位
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