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硫代葡萄糖苷,简称硫苷,是一类具有广泛生物活性的植物次生代谢物质。异硫氰酸酯是十字花科中大量存在的硫苷降解产物之一,也是迄今为止发现的最有效的天然抗癌物质。据报道,异硫氰酸酯能够有效地防止膳食中多环芳烃、杂环胺和亚硝胺等多种致癌物质引起的DNA损伤。甘蓝(Brassica oleracea L.)是十字花科芸薹属蔬菜,具有栽培适应性广、产量高、营养丰富、耐贮运等特点,在我国各地均有栽种,是富集异硫氰酸酯的价格低廉的原料。本研究以甘蓝种子和茅苗为试材,以硫苷含量为主要指标,研究培养环境、外源氨基酸对其种子萌动和芽苗体内硫苷及异硫氰酸酯含量变化的影响,建立异硫氰酸酯富集调控模式,为开发富含异硫氰酸酯的功能性产品提供理论依据。主要研究结果如下:建立了铁氰化钾分光光度法检测硫苷含量的方法。检测方法如下:磷酸盐缓冲液(0.2 mol/L, pH 7.0)提取甘蓝种子中硫苷,80℃水浴灭酶15 min,加入聚乙烯吡咯烷酮、醋酸铅/醋酸钡缓冲液饱和硫酸钠溶液,振荡离心,收集上清液即为硫苷提取液。提取液在NaOH作用下水解,水解产物与铁氰化钾溶液反应,静置离心后,取上清液于420 nm处测定吸光值。经验证该测定方法具有较好的精密性和重复性,比HPLC法简便、费用低廉。研究了甘蓝种子发芽过程中,不同孵育时间、发芽温度及光照条件对甘蓝种子及其芽苗菜生理生化变化及含硫物质的影响。研究结果表明:不同孵育时间、发茅温度及光照条件对甘蓝的芽长、根长、呼吸强度、干物质和粗脂肪等含量变化有显著影响,且显著增加了硫苷和异硫氰酸酯含量。甘蓝种子孵育3h后,在蓝光照射下30℃培养,硫苷含量呈先上升后下降再趋于平稳的趋势,在12 h时最高,达到34.78 μmol/g FW。研究了外源含硫氨基酸处理对甘蓝种子及其茅苗菜的生理生化变化、硫苷和异硫氰酸酯含量的影响。研究结果表明:甘蓝种子在甲硫氨酸、苯丙氨酸及半胱氨酸处理后,发茅0-5 d的过程中,其茅长、根长、呼吸强度、干物质和粗脂肪等指标无显著变化,但对硫苷和异硫氰酸酯含量均有显著影响,尤其是浓度为0.02 mol/L半胱氨酸培养液处理提高了甘蓝种子及其芽苗的呼吸强度、还原糖和抗坏血酸含量,硫苷含量也显著增加,异硫氰酸酯含量变化不显著。