开花是高等植物生活史中一个重要的生理过程,是影响植物成功繁殖及种子繁衍的一个重要农艺学性状。植物开花受到不同内外源环境信号的影响,通过复杂而多样的分子网络途径进行调控。研究豆科模式植物蒺藜苜蓿开花时间为培育更合适开花时间的豆科牧草提供重要的参考意义。拟南芥中自主通路成员FLOWERING LOCUS VE(FVE)主要通过表观遗传学机制抑制其下游开花抑制子FLOWERING LOCUS C(FLC)的表达从而促进开花。已有研究发现蒺藜苜蓿中没有FLC的同源基因,因此,蒺藜苜蓿中FVE同源基因调控开花时间的分子作用机理还有待研究。本研究主要通过生物信息学结合分子生物学的方法对蒺藜苜蓿MtFVE基因功能进行初步解析,并通过酵母双杂实验初步探索蒺藜苜蓿中存在保守的蛋白互作,从而为进一步研究蒺藜苜蓿MtFVE基因调控开花时间提供重要的参考价值。研究结果主要有以下几点:1.通过生物信息学方法在蒺藜苜蓿中寻找到2个拟南芥FVE的同源蛋白,将其分别命名为MtFVEa和MtFVEb。序列比对发现,2个蛋白均具有典型的WD40蛋白结合结构域。2.通过qRT-PCR实验检测MtFVEa和MtFVEb基因在蒺藜苜蓿野生型中组织表达特异性,发现这2个基因均在不同的组织中具有不同程度的表达,且均在花和营养生长期的茎尖具有较高水平的表达。RT-PCR实验检测MtFVEa和MtFVEb基因的表达模式,与qRT-PCR结果高度吻合,2个基因均在花和营养生长期的茎尖具有较高水平的表达。3.亚细胞定位分析表明,MtFVEa和MtFVEb蛋白在细胞核和细胞质中均有分布。4.为了进一步研究基因的功能,初步表型观察分析发现,MtFVEa基因和MtFVEb基因对应的功能缺失突变体相比野生型,开花时间均提前。5.酵母双杂交实验研究表明,MtFVEa蛋白与MtFLD(拟南芥FLOWERING LOCUS D,简称FLD的同源蛋白)和MtHDA6(拟南芥Histone Deacetylase 6,简称HDA6的同源蛋白)均发生蛋白互作,表明MtFVE可能同样形成FVE-FLD-HDA6三元复合体参与蒺藜苜蓿开花调控。本研究为进一步探索蒺藜苜蓿MtFVE基因的功能提供研究思路和理论支持。