论文部分内容阅读
目的：以功能性消化不良(functional dyspepsia,FD) C57BL小鼠为研究对象,观察电针足三里对FD模型C57BL小鼠胃排空率,SCF/c-kit信号通路,胃肠道间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)和SMC (smooth muscle cell,SMC)的影响,探讨电针足三里调节FD C57BL小鼠胃肠动力是否与SCF/c-kit信号通路受损,ICC和SMC改变相关,从而部分阐明电针治疗功能性消化不良的疗效机制。方法：选取36只雌雄各半的SPF级别的C57BL小鼠,随机分为空白对照组、模型组、电针组3个组,每组12只C57BL小鼠。对除空白组以外的C57BL小鼠按照饥饱失常+左旋精氨酸(L-arginine,L-Arg)综合造模法进行造模。造模结束后,禁食不禁水24h,每组随机抽取各6只C57BL小鼠灌胃半固体糊0.5g/只,15min后脱颈后处死C57BL小鼠,剖开腹腔取胃测胃残留率,明确造模成功。每组剩余6只C57BL小鼠停止造模,记录体重、饮食量等一般状态,恢复正常饮食,同时电针组给予电针治疗7天后结束。每组C57BL小鼠禁食不禁水24h,灌胃半固体糊0.5g/只,15min后处死C57BL小鼠剖开腹腔取胃,计算胃残留率,切片取胃组织,HE染色观察FD C57BL小鼠病变,再取剩余胃窦组织,用蛋白印迹法(Western Blot)测定胃窦组织中SCF和c-kit蛋白含量,用实时定量基因扩增荧光检测法(QPCR)检测胃窦组织中SCF和c-kit mRNA的表达,用免疫荧光显微镜观测ICC和SMC。结果：1、行为学指标：造模后,与空白组比较,模型组和电针组C57BL小鼠的体重及饮食量均减少(p<0.05)：治疗后,与模型组比较,电针组C57BL小鼠体重及饮食量均明显增加(p<0.05)。2、胃排空率：与空白组比较,模型组C57BL小鼠胃残留率明显升高(p<0.05)；与模型组比较,电针组C57BL小鼠胃残留率有所降低(p<0.05)3、SCF和c-kit的蛋白含量和mRNA表达：与空白组比较,模型组C57BL小鼠SCF和c-kit的蛋白含量和mRNA表达减少(p<0.05)；与模型组比较,电针组C57BL小鼠胃窦SCF和c-kit的蛋白含量和mRNA表达增加(p<0.05)4、免疫荧光显微镜观测：空白组C57BL小鼠ICC和SMC结构正常；模型组C57BL小鼠ICC和SMC数量明显减少,光密度值下降(p<0.05),结构受到破坏；电针组C57BL小鼠ICC和SMC数量增加,光密度值上升(p<0.05)结构基本保持正常。结论：1、治疗后,与模型组比较,电针组C57BL小鼠的食量、体重及胃排空率研究提示电针可以改善胃肠动力。2、电针可以上调FD C57BL小鼠胃窦组织SCF和c-kit的蛋白含量及mRNA表达,改善ICC和SMC结构,进而增强胃肠动力。