改性纳米SiO增强的尿酸酶生物传感器机理的研究

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生物传感器是一类涉及多学科的前沿诊断仪器。国内外对生物传感器展开了广泛深入的研究,来满足人们在临床检验、环境监测和生化分析等领域中的需求。 本研究将改性纳米SiO2凝胶和尿酸酶通过交联剂固定于蛋膜上,将酶膜紧贴于铂盘电极表面,然后以自制铂片电极为对电极、甘汞电极为参比电极,组成三电极体系,测定体液中尿酸的浓度。当体液中的尿酸通过酶膜时,与酶进行反应,检测出该处产生的反应电流,然后将其换算成尿酸浓度加以显示。考察了电极的选择、尿酸酶的固定量、改性纳米凝胶的修饰量、温度、缓冲溶液pH值、扫描速率等因素对尿酸酶传感器的影响。实验结果表明:选用铂盘电极、尿酸酶固定量为1U、添加浓度为1.17%改性的纳米SiO2凝胶3μL、在45℃、pH6.50、扫描速率为60mV/s的条件下进行测量,响应电流最大。尿酸浓度的检测范围在1.0×10-5~1.0×10-3mol/L,检出限为5.0×10-6mol/L,RSD为3.70%(n=10)。 本研究中增强电流响应信号的纳米SiO2采用微乳液法制备。以氨水为催化剂,利用正硅酸乙酯的水解反应,在TritonX-10/正辛醇/环己烷/氨水所组成的微乳液体系下,制备纳米SiO2。并对制备的纳米SiO2形貌进行透射电镜分析,结果显示,制备的纳米SiO2颗粒为均匀球形,粒径在80nm左右。 本研究中纳米SiO2的改性采用接枝树形分子的方法进行。首先在纳米SiO2表面导入氨基作为引发剂,然后重复进行Michael加成反应和酰胺化反应两个过程。本论文讨论了接枝代数等因素对改性效果的影响,并用红外光谱、热分析、酸碱滴定分析等手段对纳米SiO2的改性效果进行了表征。实验结果表明,随着接枝代数的增多,氨基接枝率增高,改性效果越好。
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