【摘 要】
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目的 本文通过检测诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)蛋白及其mRNA在无排卵型功能失调性子宫出血(简称无排卵型功血)患者子宫内膜组织中的表达与分
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目的 本文通过检测诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)蛋白及其mRNA在无排卵型功能失调性子宫出血(简称无排卵型功血)患者子宫内膜组织中的表达与分布情况,来探讨iNOS作为子宫内膜局部调控因子在子宫出血机制中可能起到的作用,以及子宫微环境的改变与无排卵型功血发病机制的关系,从而为功能失调性子宫出血(简称功血)的非激素治疗提供一些新的思路和途径。 方法 1.标本的采集 子宫内膜组织标本采集自2004年10月至2005年6月于中国医科大学附属第一医院妇科就诊的患者。从采集的标本中,随机选取临床诊断为无排卵型功血患者的子宫内膜60例作为实验组,其中经病理证实的单纯型增生子宫内膜40例,复杂型增生子宫内膜20例;并选取同期的正常增生期的子宫膜标本30例作为对照组,其取自因良性肿瘤而行子宫切除术的月经正常的患者。两组研究对象为年龄在25～45岁的未绝经妇女,所有患者3个月内未用过激素类药物,一年内未放置宫内节育环。将每例标本分成两份保存,以分别备用于免疫组化及RT-PCR实验。 2.实验方法 (1)RT-PCR 应用RT-PCR技术检测iNOSmRNA在子宫内膜中的表达。步骤包括:①采用RNAout试剂说明书所提供的方法进行总RNA的提取。②按RT-PCR试剂盒说明配制反应体系后进行反转录反应(RT)及PCR反应; RT反应条件为:30℃、10min,42% 30min,99℃ 5min;PCR反应条件为:
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