木蹄层孔菌化学成分及药理活性研究

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本论文对木蹄层孔菌[Fomes fomentarius(L.:Fr.)Kick.]子实体进行了化学成分、抗肿瘤活性、抑菌活性方面的研究和对木蹄层孔菌发酵物的药理活性方面的研究。化学成分研究方面,通过冷凝回流法、薄层层析法和硅胶柱层析法从木蹄层孔菌子实体的石油醚提取物和氯仿提取物中分离出2个化合物,并运用MS、1H-NMR,13C-NMR、DEPT等手段进行了鉴定。这2个化合物分别为:麦角甾-4,6,8,22-四烯-3-酮、麦角甾-7,22-二烯-3-酮。通过高效液相色谱法从木蹄层孔菌子实体的甲醇提取物中分离了1个化合物,并运用1H-NMR、13C-NMR、DEPT等手段进行了鉴定,经鉴定比对化合物为:3,3-二甲基(8-羟基-3-辛烯基)环己醇。抗肿瘤活性研究方面,用木蹄层孔菌子实体的石油醚提取物上清液、石油醚提取物沉淀、麦角甾醇和麦角甾醇过氧化物、氯仿提取物、甲醇提取物对H22荷瘤小鼠进行了体内抗肿瘤实验。结果表明,石油醚提取物、麦角甾醇及麦角甾醇过氧化物、甲醇提取物都有明显的抑制肿瘤生长作用。与阳性药组对比,脾指数和胸腺指数都明显增加,而且都可以明显增加H22荷瘤小鼠的白细胞数,H22荷瘤小鼠血清中IL-2的含量也有明显增高,说明木蹄层孔菌子实体的石油醚提取物和从其中分离得到的麦角甾醇和麦角甾醇过氧化物不但对肿瘤的生长有抑制作用,而且能够提高机体的免疫力。另外,对麦角甾醇和麦角甾醇过氧化物进行了诱导人肝癌细胞凋亡实验,结果表明麦角甾醇和麦角甾醇过氧化物均能诱导肝癌细胞凋亡,达到抑制肝癌细胞分裂的效果,进而治疗肿瘤疾病。抑菌活性研究方面,对木蹄层孔菌子实体的甲醇提取物进行了体外抑菌实验。结果表明,甲醇提取物对大肠杆菌ATCC8099和金黄色葡萄球菌ATCC6538有明显的抑制作用,且均有量效关系,当甲醇提取物浓度为50mg/ml时,对大肠杆菌ATCC8099和金黄色葡萄球菌ATCC6538的抑菌率分别高达99.39%和95.10%。发酵物方面,对木蹄层孔菌进行了液体摇床培养,得到的发酵产物进行了药理活性方面的研究,对木蹄层孔菌菌种的发酵产物进行了体外抑菌实验和体内抗肿瘤实验。体外抑菌实验结果表明,木蹄层孔菌的发酵产物中含有与木蹄层孔菌子实体相似的抑菌活性成分,并且菌液的抑菌效果高于菌球的抑菌效果,说明木蹄层孔菌的发酵液有较好的药理活性,可以进一步研究开发。木蹄层孔菌的发酵产物生产时间较短,产量较高,所以可以广泛推广生产,为真菌类药物的开发利用提供了一定的基础。体内抗肿瘤实验结果表明,木蹄层孔菌发酵物对H22荷瘤小鼠肿瘤生长有明显的抑制作用,且均呈量效关系。说明木蹄层孔菌发酵物中也可能含有与木蹄层孔菌子实体类似的抗肿瘤活性成分,有待于进一步研究。
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