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【背景】妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)指孕前糖代谢正常,妊娠期间发生或首次发现的糖耐量异常,是妊娠期最常见的并发症之一[1]。目前随着孕妇年龄、生活方式及饮食结构的改变,GDM发病率逐年增加高至17.5%[2]。GDM容易造成多种不良结局,对母婴有严重危害甚至有长远影响。现普遍认为GDM的发病机制复杂,可能是炎症因子、胰岛素抵抗、胰岛β细胞功能缺陷、遗传、环境等多因素共同作用的结果。已有研究表明,妊娠期间的表观遗传学改变可能是研究环境对妊娠影响的重要方向之一[3]。表观遗传学(Epigenetics)是指基因的核苷酸序列未发生改变而基因的表达发生可遗传性变化,包括DNA甲基化、组蛋白修饰、染色体重塑和非编码RNA non-coding RNA,ncRNA)调控等。表观遗传学主要通过对基因转录或翻译过程的调控,影响其功能和特性[4,5]。微小RNA(microRNA,miRNA)是一类在表观遗传学水平发挥调控作用的单链小分子ncRNA[6]。其中miRNA-101(microRNA-101,miR-101)家族高度保守,可在转录后水平调节多种基因表达,与肿瘤的发生、糖脂代谢异常、器官纤维化、炎症反应等多种疾病密切相关[7,8]。Zeste同源物增强子2(enhancer of zeste homolog2,EZH2)能使核小体组蛋白H3的第27位赖氨酸侧链上的氨基发生三甲基化成为H3K27me3。H3K27me3可将核心蛋白复合体2(polycomb repressive complex 2,PRC2)募集至某一个特定基因位点,沉默该靶基因的表达。胎盘是母胎交换营养物质的重要场所,胎盘滋养细胞对母体子宫内膜的黏附及侵入是胎盘形成的前提。滋养细胞的功能障碍可能与妊娠期高血压、GDM、胎儿生长受限、流产等妊娠并发症密切相关[13,14],而目前关于miR-101在滋养细胞中的作用未见报道。基于此,本研究将探讨miR-101对胎盘滋养细胞功能的影响,以及其在GDM中可能的调控机制。【目的】揭示妊娠期糖尿病(GDM)患者与正常孕妇胎盘中miRNA-101的表达差异;通过上调和抑制人绒毛膜滋养细胞(HTR-8/SVneo)中miR-101的表达,研究其对胎盘滋养细胞增殖和迁移能力的影响,从而探讨其在妊娠期糖尿病中可能的作用机制。【方法】收集GDM患者及正常孕妇胎盘组织,利用PCR、Western blot检测胎盘中miR-101及下游因子EZH2的表达,采用免疫组化检测胎盘中EZH2及其下游因子H3K27me3的定位及表达;分别上调和抑制HTR-8/SVneo细胞中的miRNA-101,PCR法检测EZH2的mRNA表达水平,Western blot检测EZH2及H3K27me3的蛋白表达,再通过CCK-8法检测其对细胞增殖能力的影响,Transwell实验检测其对细胞迁移能力的影响。【结果】在GDM患者与正常孕妇胎盘中EZH2及H3K27me3均有表达且定位于胎盘滋养细胞;GDM患者胎盘中miR-101 mRNA表达明显高于正常孕妇胎盘,EZH2 mRNA表达低于对照组,EZH2及H3K27me3蛋白表达低于对照组;过表达miR-101后,HTR-8/SVneo细胞内EZH2 mRNA降低,EZH2及H3K27me3蛋白表达降低,细胞增殖能力降低,迁移能力降低;敲低miR-101后,EZH2 mRNA升高,EZH2及H3K27me3蛋白表达升高,胎盘滋养细胞增殖能力无明显变化,迁移能力提高。结论:miR-101调控EZH2-H3K27me3通路使胎盘滋养细胞增殖能力有所下降,迁移能力降低,从而导致胚胎发育过程中胎盘结构和功能异常,参与GDM的发生。