目的 关节软骨损伤是骨科临床的常见疾病。成熟关节软骨的自身修复能力较差，除与软骨内无血管、缺乏未分化的软骨细胞及软骨细胞被固定在一个致密的由胶原和蛋白多糖组成的固体基质中有关外，可能还与以下两个因素有关：①内在修复依赖于软骨细胞有丝分裂及短期内增加的代谢产物（主要是胶原和蛋白多糖），而成熟软骨细胞有丝分裂能力极低：②外部愈合依赖于来自软骨下骨的间充质成分的参与，形成新的结缔组织，经过一系列变化形成纤维软骨。20世纪80年代以来，组织工程技术的迅速发展，为这一难题的解决提供了前所未有的机遇。人们利用软骨组织工程技术，将细胞和支架材料复合培养，修复软骨缺损已经取得了初步成效。本课题研究的目的是采用软骨组织工程技术，体外分离骨髓间充质干细胞（MSCs）培养、传代后与软骨细胞以7∶3混合再与Ⅱ型胶原支架材料和PLGA复合培养，观察细胞在两种支架材料上黏附、伸展和增殖情况，并观察其在动物实验中修复兔关节软骨缺损的情况。期望能够找到软骨组织工程理想支架材料与种子细胞。 材料和方法 1．取3-4月龄健康新西兰大白兔，穿刺抽取双侧胫骨上端骨髓6-8ml，Percoll分离法分离骨髓间充质干细胞，进行原代、传代细胞培养。 2．取3月龄新西兰白兔关节非负重区关节软骨，将软骨片剪成0.3cmxo.3cm大小，以0.2％的Ⅱ型胶原酶消化8—10分钟，离心、洗涤、计数。将细胞接种于50ml培养瓶中，加入10％胎牛血清培养液5ml，在37℃、5％CO₂、湿度饱