红活麻总黄酮的制备及防治T2DM-IR作用研究

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目的:从红活麻乙酸乙酯部位分离提取总黄酮,并从体内及蛋白质水平研究分析红活麻抗胰岛素抵抗2型糖尿病的作用及机制。方法:采用碱提酸沉法从红活麻乙酸乙酯部位中提取分离总黄酮,并采用黄酮类化合物的显色反应进行理化鉴定,用标准曲线法测定总黄酮含量;在BALB/c小鼠体内采用高脂饲料喂养联合小剂量STZ注射建立小鼠胰岛素抵抗2型糖尿病模型;采用每日灌胃的给药方式观察不同浓度总黄酮(25, 50,100 mg/kg)对该糖尿病模型血糖浓度等的影响,第28d处死动物取血清进行超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)的测定,ELISA检测血清胰岛素含量,取胰腺进行HE染色检测小鼠胰腺病理改变,取肝脏进行免疫组化及免疫印迹测定胰岛素受体及过氧化酶增殖活化受体-γ(PPAR-γ)的蛋白表达状况。结果:利用高脂饲料喂养及小剂量STZ注射建立胰岛素抵抗2型糖尿病模型。与模型组相比,总黄酮组血糖值明显降低(P<0.01),胰腺HE染色结果显示各组无明显差异。低剂量组具有明显的降低甘油三酯、总胆固醇及胰岛素抵抗指数和改善胰岛素抵抗小鼠的糖耐量(P<0.05)作用。胰岛素测定结果显示除了高剂量组明显增加胰岛素以外,其他各组无明显变化,各组SOD和MDA水平也无明显变化。同时,对胰岛素受体和PPAR-γ的免疫印迹结果表明,总黄酮低剂量组增加胰岛素受体水平的表达。结论:通过上述实验结果初步证明:红活麻总黄酮通过上调胰岛素受体水平和增加胰岛素敏感性发挥降糖降脂作用,并非通过影响传统的自由基途径来实现。研究一方面确定红活麻的总黄酮成分群,发现其降糖降脂作用;另一方面也为胰岛素抵抗2型糖尿病模型的建立及分子机制分析奠定基础。
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