缺氧诱导因子2在生理妊娠和妊高征胎盘中的表达及其意义

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目的:(1)研究缺氧诱导因子2(hypoxia inducible factor-2,HIF-2)在早期胚胎、早期绒毛组织和胎盘中的表达,探讨HIF-2在妊娠中的作用及其可能的机制。(2)研究HIF-2在妊娠高血压综合征(妊高征)胎盘中的表达,探讨其在妊高征病理生理过程中的作用及其可能的机制。 方法:(1)体外培养孕6-8周的绒毛组织及早期胚胎,分别利用RT-PCR及巢式PCR检测绒毛组织及早期胚胎中HIF-2αmRNA的表达;应用real-time PCR方法,检测HIF-2αmRNA在正常晚期妊娠胎盘中的表达;应用免疫荧光染色及免疫组化方法,观察HIF-2α蛋白在早期胚胎及孕早期绒毛组织中的表达。(2)10例妊高征和10例正常妊娠的胎盘组织标本,取自足月剖宮产的妊高征孕妇和正常孕妇。应用real-time PCR方法,检测妊高征和正常胎盘中HIF-2αmRNA及VEGFmRNA表达水平的差异。应用Westem Blot方法,检测妊高征和正常胎盘中HIF-2α蛋白表达水平的差异。应用免疫组织化学方法,观察HIF-2α蛋白在妊高征胎盘组织细胞中的定位。(3)将BeWo细胞及绒毛组织分为4组,分别在常氧、缺氧、反义及正义寡核甘酸封闭HIF-2α后,在体外进行缺氧培养;检测4
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