发育过程鸡AChRγ基因表达及-324/-50序列结合活性分析

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哺乳类动物AChRγ亚基在胚胎期表达,出生后消失而代之以ε亚基.这种表达置换规律迄今仅发现于哺乳类动物,禽类γ亚基在胚胎期/出生后表达变化一直无正式报道.为观察鸡发育过程γ基因表达动力学,该实验采用聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测了鸡胚发育第9天至孵出后6周期间肌组织AChRγ亚基mRNA.结果显示,从鸡胚发育9天始、至出生后6周的雏鸡待检的肌组织均检出有γ亚基mRNA转录,提示鸡发育过程γ基因表达与哺乳类不同,不存在γ/ε亚基的置换表达规律.已经证明,E盒与myogenin蛋白相互作用为AChRγ亚基基因表达所必需;myogenin蛋白在两周龄雏鸡中仍有表达,说明MyoD家族在鸡γ基因出生后表达中起作用.为进一步鉴定是否尚有其它特异因子在γ亚基表达中起作用,该研究采用-324/-240及-239/-50片段(不含或只含单个反向E盒)为探针,分别与鸡发育过程不同时期的肌核抽提物进行结合分析.结果发现,在2周龄雏鸡肌核抽提物中仍有-239/-50结合活性,提示除MyoD家族外尚有其它因子对γ基因的出生后表达贡献.
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