环氧合酶-2抑制剂Rofecoxib抑制小鼠视网膜新生血管形成的实验研究

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目的 研究环氧合酶-2(cyclooxygenase-2 COX-2)是否在氧诱导的鼠视网膜新生血管上表达及COX-2抑制剂Rofecoxib是否抑制视网膜新生血管的形成及其作用机制。 方法 第一部分: 出生后7d的C57BL/6J幼鼠28只随机分成正常对照组14只,在正常空气环境下饲养10天。给氧组14只,在高氧环境下饲养5天,然后回到正常空气环境下饲养5天。荧光素血管灌注观察视网膜血管形态,HE染色计数与内界膜有关系的血管内皮细胞核。免疫组织化学检测视网膜中COX-2、VEGF蛋白表达;RT-PCR检测COX-2和VEGFmRNA。 第二部分: 同日出生的2窝C57 BL/6J小鼠各10只,随机分为治疗组和未治疗组。同时置于高氧环境下饲养5天后,在正常环境中饲养,治疗组每日1次腹腔注射COX-2抑制剂Rofecoxib 15me/kg,未治疗组注入等量的生理盐水,连续5d。荧光素血管灌注观察视网膜血管形态,HE染色计数与内界膜有关系的血管内皮细胞核。免疫组织化学检测视网膜中COX-2、VEGF蛋白表达;RT-PCR检测COX-2和VEGFmRNA。 第三部分: 取传代的人脐静脉血管内皮细胞随机分为正常组和缺氧组,免疫细胞化学染色法检测:正常氧环境和缺氧环境培养24h细胞,VEGF、HIF-1α、
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