中草药复合制剂对仔猪大肠杆菌性腹泻治疗效果研究

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仔猪大肠杆菌性腹泻是由肠毒素型大肠杆菌(ETEC)引起的一种新生仔猪传染性疾病,是严重危害养猪业的重要疾病之一,往往给养猪业带来了巨大的经济损失。因此,在现代养猪业中,预防和治疗仔猪大肠杆菌性腹泻是亟待解决而且必须解决的问题。目前,由于长期使用抗生素药物会使细菌对药物的敏感性降低,产生极大的耐药性和药物残留;此外,由于大肠杆菌存在许多不同的血清型以及菌毛基因的不同,所以应用疫苗也很难做到全面预防。因此,研制出一种新的药物预防和治疗该疾病已经迫在眉睫。在我国,应用中药治疗疾病已有几千年的历史,中药含有很多活性成分,具有抗菌以及提高免疫力的作用,而且不存在药物残留等问题。目前,在临床上已经有中药用于治疗仔猪的大肠杆菌性腹泻。因此,应用中草药治疗仔猪大肠杆菌性腹泻是一种很好且有效的选择。本研究旨在筛选治疗仔猪大肠杆菌性腹泻的有效药物和方剂,为今后应用于该病的治疗提供理论依据。研究内容及结果如下:首先选择28日龄的仔猪以及肠毒素大肠杆菌建立了仔猪腹泻的模型,确定了引起仔猪腹泻的大肠杆菌的最佳攻毒剂量为6×109CFU/mL。然后通过查找中外文文献选择23种中药,并进行了对大肠杆菌最小抑菌浓度(MIC)的测定,根据各味中药的MIC值以及配伍禁忌和原则将中药组成两副方剂。进而对两副方剂及恩诺沙星对照组进行了体外抑菌实验,结果显示中药方剂一的抑菌环为1.436±0.024cm,方剂二的抑菌环为1.367±0.016cm,恩诺沙星的抑菌环为1.313±0.019cm。在此基础上,将中药复方制剂以及西药按照分组给腹泻仔猪喂服,检测中药对仔猪大肠杆菌性腹泻的治疗效果。试验设计为:将20头28日龄仔猪随机分成四组:空白组(不喂任何药物)、中药方剂一组、中药方剂二组、恩诺沙星组,在用药前各组每只仔猪灌服5mL的6×109CFU/mL大肠杆菌菌液。待全部腹泻后,根据分组喂服药物,连续10天,在喂服药物期间每两天记录各组仔猪的体重、采食量、粪便计分、治愈率、有效率、死亡率、排菌数量。待第10天清晨给仔猪喂服药物2小时后,于仔猪前腔静脉进行无菌取血,检测其外周血液中淋巴细胞的转化增殖能力、血清的抑菌实验测定抑菌环大小。宰杀后取小肠各个肠段进行HE染色做成病理切片,观察各个肠段的病理组织学变化。结果显示:中药方剂一组仔猪的平均体重和平均增重与空白组比较差异极显著(P<0.01),中药方剂一组仔猪平均体重高于中药方剂二组和恩诺沙星两组;中药方剂一组、中药方剂二组和恩诺沙星组的平均日采食量均高于空白组,其中中药方剂一组仔猪的平均日采食量与空白组相比差异显著(P﹤0.05),方剂一组平均日采食量均高于方剂二组和恩诺沙星组;中药方剂一组、中药方剂二组和恩诺沙星组的粪便计分均低于空白组,其中中药方剂一组的猪的粪便计分与空白组的粪便计分相比差异显著(P﹤0.05),方剂一组粪便计分均低于方剂二组和恩诺沙星组;中药方剂一组、中药方剂二组和恩诺沙星组的治愈率、有效率均高于空白组且差异显著(P﹤0.05),方剂一组的治愈率和有效率均高于方剂二组和恩诺沙星组;中药方剂一组、中药方剂二组和恩诺沙星组的排菌数量均低于空白组且差异极显著(P<0.01),其中中药方剂一组的排菌数量与中药方剂二组相比差异显著(P﹤0.05)且方剂一组排菌数低于方剂二组;中药方剂一组仔猪外周血中淋巴细胞增殖能力即SI值均高于空白组、中药方剂二组和恩诺沙星组,且中药方剂一组的SI值和空白组SI值相比差异极显著(P﹤0.01),中药方剂二组和恩诺沙星两组的SI值与空白组相比差异显著(P﹤0.05);血清抑菌实验结果显示空白组抑菌环0.600±0.000cm,方剂一组抑菌环1.832±0.171cm,方剂二组抑菌环1.625±0.226cm,恩诺沙星组1.607±0.135cm,中药方剂一组抑菌环直径与空白组的直径大小相比差异极显著(P﹤0.01)。病理切片显示,空白组十二指肠、空肠绒毛脱落,黏膜下层出血,炎性细胞增多;中药方剂一组十二指肠空肠的小肠绒毛完整,肠腺结构清晰,细胞核结构完整;中药方剂二组十二指肠、空肠肠道腺体结构不清晰,炎性细胞增多;恩诺沙星组十二指肠、空肠肠腺部分坏死,部分肠绒毛有炎性细胞浸润,部分出现出血的现象。综合各项数据结果表明:中药方剂一、方剂二均能够在一定程度上对仔猪大肠杆菌性腹泻具有较好的疗效,但方剂一的效果最好。
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