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近年来,网络药理学技术迅猛发展,既为中药现代化研究提供了新视角,又为中药复方药效物质基础研究提供了新方法。补血益母丸具活血调经、气血双补、祛瘀生新之功效,为临床治疗产后血虚、血瘀等妇科疾病常用中药复方。然而,其药效物质基础及作用机理尚未见报道。我们拟以补血益母丸及核心药对“当归-益母草”为研究对象,采用网络药理学与实验验证技术,研究“当归-益母草”治疗II型糖尿病、妇科疾病药效物质基础和作用机制,进一步研究补血益母丸治疗失血性贫血的药效物质及协同作用机理。主要内容如下:(1)基于网络药理学,揭示“当归-益母草”药对治疗Ⅱ型糖尿病的分子机制。筛选出32个抗II型糖尿病活性成分,富集到43个潜在靶点。“当归-益母草”活性成分通过调控靶点既能降血糖,也能改善Ⅱ型糖尿病并发症症状。(2)“当归-益母草”药对治疗妇科疾病的协同调控机制。筛选出72个活性成分可治疗痛经、子宫内膜异位、子宫内膜炎、盆腔炎、贫血等疾病,富集到49个核心靶点及15条关键通路。基因GO富集及KEGG通路分析表明,钙离子信号、VEGF、MAPK、PI3K-Akt通路与该药对的补血、活血化瘀、镇痛抗炎等药理作用密切相关。ELISA实验表明,该药对活性成分能下调IL6、VEGF、TNF-α和PTGS2的活性,从而缓解痛经小鼠的症状。(3)补血益母丸化学成分研究。采用GC-MS、UPLC-Q-TOF/MS技术鉴定了补血益母丸化学成分,共鉴定了62个化合物,其中包括黄酮13个,萜类11个,苯丙素类6个,脂肪烃类5个,生物碱2个,其它类25个。(4)补血益母丸对失血性贫血的协同作用机理。首先,采用网络药理学结合药-靶构效关系筛选出31个活性成分,富集到52个核心靶点及5条核心通路。其中,网络分析发现,补血益母丸治疗失血性贫血的药理作用是促进造血和血液循环,增强免疫力,发挥气血双补的疗效。其次,以失血性贫血大鼠外周血指标为考察因素,发现补血益母丸能够显著性提升RBC、HGB和HCT含量。进一步采用ELISA分子实验评估失血性贫血大鼠血液中关键靶点的变化规律,结果显示补血益母丸能够显著性下调EPO、IL6、CSF3、NOS2、VEGFA、PDGFRB和TGFB1。综上所述,“当归-益母草”药对治疗II型糖尿病和妇科疾病、补血益母丸治疗失血性贫血,均具有中药多成分、多通道、多靶点协同调控作用的特征。