Rab蛋白是Ras家族最大的家族成员,主要参与细胞内蛋白质的运输。其蛋白水平表达的高低及其GTPase活性的变化,都会导致相关细胞器工作的紊乱,致使机体发生病变,甚至诱发癌症。目前在哺乳动物中,已发现70多种Rab蛋白。我们深入研究了其中的大部分,并且取得了一定的成就,但关于Rab家族成员Rab15的研究报道甚少。本文拟探讨Rab15蛋白在细胞中的定位及其细胞生物学功能。通过免疫荧光技术,标记不同细胞器的内源性Marker,发现Rab15定位于高尔基,且与内体和溶酶体没有明显的共定位。检测其蛋白水平表达情况,结果显示Rab15在高侵袭的乳腺癌细胞中表达量普遍较低。于是在高侵袭乳腺癌细胞MDA-MB-231中过表达Rab15,探究其对细胞的影响。通过细胞计数后绘制生长曲线、MTT法获取细胞活性曲线、结晶紫染色细胞,结果显示过表达Rab15抑制高侵袭乳腺癌细胞的生长。通过划痕实验、小室内迁移和侵袭实验、发现过表达Rab15抑制高侵袭乳腺癌细胞的迁移侵袭。进一步探究其影响机制,采用免疫印迹检测了一些与细胞生长增殖、侵袭迁移相关的蛋白,发现在高侵袭乳腺癌中过表达Rab15后,EGFR和金属蛋白酶-2(MMP2)的表达量都有所下降。EGFR与肿瘤细胞的增殖、细胞凋亡的抑制和肿瘤侵袭、转移相关。而MMP2会降解基底膜中的Ⅳ型胶原蛋白。结合以上研究结果,初步推测Rab15过表达后能够通过抑制EGFR相关的下游信号传导,从而抑制细胞的增殖;而过表达Rab15之后抑制MMP2降解细胞外基质,进而抑制了细胞的迁移与侵袭。以上研究工作,为深入研究Rab15的生物学功能及其相关分子机制奠定了基础。