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目的：近年来非酒精性脂肪肝病(Non alcoholic fatty liver disease，NAFLD)的发病率持续增加，但是其发病机制尚不明确。氧化应激损伤被认为在NAFLD的“二次打击”中扮演着重要角色。Klotho与氧化应激和代谢性疾病关系密切。Klotho启动子甲基化调控Klotho的表达。本研究目的在于探讨NAFLD患者血浆氧化应激损伤水平和Klotho基因启动子甲基化状态，为NAFLD的发病机制和干预措施提供有力的理论和实验依据。 方法：根据本研究制定的纳入和排除标准，采用随机数字表法选择56名在西南医科大学附属医院确诊为NAFLD的患者，另选50名健康人群作为对照组。收集所入选人群的一般资料，包括年龄、性别、身高、体重等。收集两组人群静脉血，高密度脂肪蛋白（high-density lipoprotein，HDL）、低密度脂蛋白(low-density lipoprotein，LDL)、总胆固醇(total cholesterol，TC)、甘油三酯(triglyceride，TG)采用全自动血生化分析仪检测。全自动血生化分析仪检测谷草转氨酶(Aspartate aminotransferase，AST)、谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase，ALT)和谷氨酰转肽酶(Glutamyl transpeptidase，GGT)。采用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)试剂盒检测血浆超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase，SOD)、丙二醛(Malondialdehyde，MDA)和过氧化氢酶(Catalase，CAT)水平检测。实时荧光定量PCR(Real-time Quantitative PCR Detecting System，qPCR)和蛋白质印迹法(Western-blot)分别检测血浆Klotho的基因和蛋白水平表达。相关性采用Pearson相关性分析。Klotho启动子甲基化水平采用甲基化特异性PCR(Methylation-specific PCR，MS-PCR)检测。采用软件SPSS19.0进行统计分析。采用DAgootino-Pearson法对计量数据进行正态性检验，符合正态分布的采用t检验，数据用Mean±SD表示。非正态分布采用独立样本非参数检验Mann-Whitney法，数据用Median±IQR。率或构成比比较采用卡方检验。资料相关性采用Pearson相关性分析。P＜0.05表示差异有统计学意义。 结果：观察组体重明显高于对照组(t=4.616，P＜0.0001);观察组BMI指数明显高于对照组（t=3.756，P=0.0003）;观察组TG明显高于对照组（t=4.576，P＜0.0001）;观察组TC明显高于对照组（t=5.411，P＜0.0001）;观察组LDL明显高于对照组(t=2.912，P=0.0044);观察组ALT明显高于对照组（t=9.787，P＜0.0001）。与对照组相比观察组血浆SOD含量（t=3.254，P=0.0015）和CAT（t=9.338，P＜0.0001）明显降低。观察组人群ALT水平与血浆SOD含量呈负相关（r=-0.3581，P=0.0067），与CAT含量呈负相关（r=-0.3317，P=0.0125）。通过对两组人群血浆中Klotho的mRNA的检测发现，与对照组相比，观察组Klotho基因mRNA(t=19.13，P＜0.0001)和蛋白表达（t=15.30，P＜0.0001）均明显降低。观察组人群Klotho蛋白表达量与其血浆SOD水平（r=0.3667，P=0.0054）和CAT水平（r=0.2980，P=0.0257）呈正相关。对照组Klotho甲基化率为24％;观察组甲基化率为64％，差异有统计学意义（x2=17.302，P＜0.0001）。 结论：氧化应激损伤在NAFLD的“二次打击”中扮演了重要角色，Klotho甲基化是NAFLD患者血浆氧化应激状态的一个临床标志物。