基于OSMAC策略的一株球毛壳菌次生代谢产物及其生物活性研究

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本文以课题组前期从银杏叶片中分离得到内生真菌球毛壳菌为研究对象。采用OSMAC策略确定其培养基配方及其化学诱导剂的种类,对该菌采用燕麦固体培养基以及课题组前期筛选的液体培养基发酵,之后用硅胶、凝胶和反相柱等色谱分离方法并结合薄层色谱分析对发酵物的乙酸乙酯萃取部分进行分离纯化。对分离得到的单体化合物通过质谱(EI-MS、ESI-MS)以及核磁(1H-NMR、13C-NMR)等波谱技术进行结构鉴定,并进行抑藻活性,化感活性和杀线虫活性的研究,其结果如下:(1)从燕麦固体发酵物的乙酸乙酯萃取部分离出5个编号为I-V的化合物,鉴定其分别为:brefeldin A(I)、cytochalasin J(II)、di-2-ethyl hexyl phthalate(III)、zygosporin D(IV)、7-O-β-D-galactosyl-brefeldin A(V)。(2)从液体发酵物的乙酸乙酯萃取部分离出7个编号为VI-XII的化合物,,鉴定其分别为:cytochalasin B(VI)、cytochalasin N(VII)、cytochalasin H(VIII)、19,20-epoxyctochalasin-Q(IX)、chaetoglobosin A(X)、19-0-acetylchaetoglobosin A(XI)、chaetoglobosin C(XII)。这些化合物均属于生物碱类化合物。(3)通过小球藻法将化合物:brefeldin A(I)、cytochalasin J(II)、cytochalasin B(VI)、chaetoglobosin A(X)、chaetoglobosin C(XII)进行两种藻类的抑藻活性测试,实验结果显示:球毛壳甲素(X)(10μg/ml)对小球藻有明显的抑制作用,抑制率达到76.82%;通过培养皿法将化合物:brefeldin A(I)进行九种植物的化感活性测试,实验结果显示:brefeldin A(I)(5μg/m L)完全抑制马齿苋和车前草这两种杂草种子的生根和发芽,其RI值分别为-1,-1,并且对萝卜种子的生根发芽有一定的促进作用;线虫急性毒活性测试结果表明brefeldin A(I)对秀丽隐杆线虫无明显的毒力作用。综上所述,本研究基于OSMAC策略从一株球毛壳菌中分离出15个化合物,鉴定了12个,其中的几种化合物具有抑藻活性和化感活性,无杀线虫活性。证明该菌具有开发成生物除草剂的潜力。
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