【摘 要】
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联苯菊酯主要用于果蔬、禾谷类等作物的害虫防治。麻保沙星是一种动物专用的氟喹诺酮类药物。不合理的使用会导致它们在食品中的残留超标,长期食用这种超标食品会对人体造成一定的危害。因此,建立联苯菊酯和麻保沙星的检测方法具有重要意义。目前联苯菊酯和麻保沙星的检测方法主要有仪器分析方法和免疫分析法。仪器检测方法具有设备昂贵,样品前处理复杂等不足,无法实现快速检测。免疫分析法具有检测成本低、操作简单的优点。此外
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联苯菊酯主要用于果蔬、禾谷类等作物的害虫防治。麻保沙星是一种动物专用的氟喹诺酮类药物。不合理的使用会导致它们在食品中的残留超标,长期食用这种超标食品会对人体造成一定的危害。因此,建立联苯菊酯和麻保沙星的检测方法具有重要意义。目前联苯菊酯和麻保沙星的检测方法主要有仪器分析方法和免疫分析法。仪器检测方法具有设备昂贵,样品前处理复杂等不足,无法实现快速检测。免疫分析法具有检测成本低、操作简单的优点。此外,氧化石墨烯被还原后,能大大提高电极的导电性,从而提高电化学免疫传感器的灵敏度。胶体碳价格便宜,易于制备和保存;和金标试纸条相比,拥有更高的灵敏度。因此,建立了联苯菊酯和麻保沙星的免疫分析法。研究内容及结果如下:1.建立了联苯菊酯的间接竞争酶联免疫分析法（Indirect competitive enzyme-liked immunosorbent Assay,ic-ELISA）。首先,功夫菊酸通过2步化学反应合成联苯菊酯半抗原,用核磁共振氢谱和质谱法对合成半抗原进行表征;半抗原通过重氮化法偶联载体蛋白（BSA或OVA）制备抗原,用紫外法表征;免疫试验小鼠,得到联苯菊酯抗血清。优化酶联免疫吸附法的反应条件,得出该方法的IC50值5.31±0.14 ng/m L,检测限IC10 0.72±0.08 ng/m L,检测范围1.44～19.67 ng/m L。试验表明该方法特异性好;选择白菜、苋菜、苦瓜样品进行添加回收试验,加标回收率为88.6%～95.7%,相对标准偏差为1.60%～5.86%。结果表明,建立的酶联免疫吸附法可用于农产品中联苯菊酯残留的检测。2.基于氧化石墨烯-壳聚糖（Graphene oxide-Chitosan,GO-CS）复合膜构建了麻保沙星电化学免疫传感器。用扫描电子显微镜对制备GO-CS复合膜进行表征;用制备GO-CS复合膜修饰玻碳电极,用循环伏安法对复合膜中GO进行还原,然后固定麻保沙星抗体到修饰电极表面,用循环伏安法对电极修饰过程进行表征;用差分脉冲伏安法对麻保沙星免疫传感器的检测条件和方法学性能进行研究。在最佳条件下,麻保沙星浓度在2.0～40.0 ng/m L范围内与峰值电流呈良好的线性关系,检测限为0.08 ng/m L;另外,所制备电化学免疫传感器的特异性好、稳定性高。选择猪肉和牛奶进行添加回收试验。加标回收率为84.40%～96.36%,相对标准偏差为0.60%～6.17%。结果表明,构建的电化学免疫传感器可以用于动物性食品中麻保沙星残留的检测。3.制备了胶体碳标记的麻保沙星免疫层析试纸条。以试纸条显色程度和消线值为指标对碳标试纸条的反应条件进行优化。在最佳条件下,试纸条的消线值4 ng/m L,利用Image J软件读取光密度值,计算得出试纸条的半定量检测限0.40 ng/m L。所制备的胶体碳标免疫层析试纸条特异性好、稳定性高。对阴性奶粉样和鸡肉样进行加标回收试验,UPLC的加标回收率94%～105%,相对标准偏差为0.8%～5.37%,试纸条的加标回收率为92%～102.5%,相对标准偏差为1.25%～5.27%。结果表明,制备的试纸条可以用于动物性食品中麻保沙星残留的检测。
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