酪氨酸酶是调控黑色素产生的关键酶。酪氨酸酶抑制剂可以治疗由色素沉积导致的病症、作为水果和蔬菜的防腐剂、化妆品的美白添加剂和生物除虫剂。近年来,随着酪氨酸酶抑制剂研究的深入,追求高特异性、高安全性、毒性低、高效能的酪氨酸酶抑制剂成为研究热点。天然酪氨酸酶抑制剂具有易氧化、含量低、组成复杂等特性,常规方法无法完成有效的分离和分析。本研究以甘草和红花为原材料,将高效液相色谱-离子迁移谱联用技术（HPLC-IMS）首次运用于黄酮类化合物的分析,以拓宽液相色谱-离子迁移谱的应用范围,为黄酮类化合物的分析提供新的方法。主要研究结果如下:1.甘草甜味素化学成分及活性研究。利用制备液相色谱和循环制备液相色谱等分离方法和核磁共振仪鉴定,从甘草甜味素中分离得到了6个黄酮类化合物,分别为异甘草苷、甘草苷、异甘草素、甘草素、刺甘草查尔酮和甘草查尔酮B。使用96孔酶标板法测定了6种化合物的抗氧化活性（DPPH法和ABTS⁺法）和酪氨酸酶活性。结论:DPPH法:甘草素、异甘草素、刺甘草查尔酮和甘草查尔酮B的IC₅₀值依次为0.59 mg/mL、0.66 mg/mL、0.60 mg/mL、0.90 mg/mL,甘草苷和异甘草苷活性较低无法准确计算其IC₅₀值。ABTS⁺法:甘草素、异甘草苷、异甘草素、刺甘草查尔酮和甘草查尔酮B的IC₅₀值依次为0.47 mg/mL、0.02 mg/mL、0.05 mg/mL、0.54 mg/mL、0.83 mg/mL,甘草苷活性较低无法准确计算其IC₅₀值。酪氨酸酶单酚酶抑制率:异甘草素、刺甘草查尔酮、甘草素和甘草查尔酮B的IC₅₀值依次为0.91 mg/mL、0.85 mg/mL、0.87 mg/mL、0.82 mg/mL,甘草苷和异甘草苷活性较低,未计算其IC₅₀值。酪氨酸酶二酚酶抑制率:异甘草素、异甘草苷、甘草素、刺甘草查尔酮的IC₅₀值依次为0.69 mg/mL、0.76 mg/mL、0.73 mg/mL、0.83 mg/mL,甘草苷和甘草查尔酮B活性较低,无法准确计算其IC₅₀值。动力学研究表明甘草苷、异甘草苷、刺甘草查尔酮、甘草素、甘草查尔酮B和异甘草素对酪氨酸酶的抑制为可逆混合型抑制。研究说明甘草中大量存在的异甘草素、刺甘草查尔酮、甘草素和甘草查尔酮B具有良好的抗氧化活性及酪氨酸酶抑制活性,具有良好的开发应用前景。2.采用高效液相色谱-离子迁移谱和高效液相色谱-质谱联用对甘草中黄酮类化合物的定量与定性分析。用甘草苷、异甘草苷、异甘草和甘草素作为标准品,使用高效液相色谱-离子迁移谱法建立了甘草黄酮类化合物定量分析的标准曲线,并依照迁移时间进行定性分析。测定甘草粗提物馏分III中甘草苷、异甘草苷、异甘草素和甘草素的含量结果如下:4.134%、3.381%、5.831%和3.684%。高效液相色谱-质谱法条件:用甘草苷、异甘草苷、异甘草和甘草素为标准品。使用高效液相色谱-质谱法建立了甘草黄酮类化合物定量分析的标准曲线,并依据分子离子进行定性分析。测定甘草粗提物馏分III中异甘草苷、甘草苷、异甘草素甘草素和的含量结果如下:3.378%、4.148%、5.814%和3.617%。3.HPLC-IMS分析红花中黄酮类化合物及活性研究。利用柱色谱分离技术,将红花分为不同的馏分,对黄酮提取物部分采用96孔酶标板进行了抗氧化活性研究（DPPH法和ABTS⁺法）和酪氨酸酶抑制活性研究,对酪氨酸酶活性较高馏分进行动力学研究。采用HPLC-IMS联用方法分析酪氨酸酶抑制活性较高组分。DPPH法:红花粗提物、红花水洗、红花-20%、红花-50%、红花IIIb和红花IIIc的IC₅₀值依次为0.51 mg/mL、0.50 mg/mL、0.38 mg/mL、0.17 mg/mL、0.12 mg/mL和0.13 mg/mL。ABTS⁺法:红花粗提物、红花水洗、红花-20%、红花-50%、红花IIIb在浓度超过0.5 mg/mL时,清除率趋于平稳,达到90%以上,红花IIIc的IC₅₀值为0.31 mg/mL。酪氨酸酶单酚酶抑制率:红花粗提物、红花水洗、红花-20%和红花-50%抑制能力相差不大,抑制率均在20%左右,比熊果苷稍低,红花IIIb和红花IIIc的抑制能力稍强,分别为45.29%和69.15%,红花IIIc的IC₅₀值为0.72 mg/mL,说明红花各馏分对酪氨酸酶单酚酶都有一定的抑制能力。酪氨酸酶二酚酶抑制率:红花粗提物、红花水洗、红花-20%和红花-50%抑制能力相差不大,抑制率均在30%左右,抑制能力低于熊果苷的60.16%,红花IIIb和红花IIIc的抑制能力稍强,分别为55.35%和72.15%,其IC₅₀值为0.91 mg/mL和0.69 mg/mL。动力学研究表明红花IIIc对酪氨酸酶的抑制为可逆混合型抑制。