刺五加是我国传统的中药材之一,具有较为广泛的药理作用及临床应用价值,其根茎在医学上有悠久的药用历史。近年来,由于刺五加叶含有皂苷、多糖和黄酮等与根茎相同的活性成分,已作为刺五加根茎的代用品得到了广泛应用,尤其是刺五加叶中含有的皂苷类物质具有诸多生理活性引起了广泛的研究与开发,本文着重对其中一种单体皂苷进行探究。首先针对黑曲霉液态发酵所产糖苷酶的分离纯化工艺及其酶学性质进行研究。将黑曲霉液态发酵所产酶液,依次通过30%⁷0%硫酸铵盐析、膜透析和DEAE-Sepharose FF阴离子交换层析后得到高纯度糖苷酶。经SDS-PAGE凝胶电泳仅得到一条清晰条带,分子量约为65 kDa。经检测,纯化获得的糖苷酶比酶活力可达6932.54 U/mg,纯化倍数和酶活力回收率分别为13.82倍和13.30%。进一步研究发现,该酶的最适p H为4.5,最适温度为50 oC,且在20 oC⁵0 oC及pH 3.0⁶.0范围内有良好的稳定性。同时,在一定浓度下,K+、Ca²⁺和Na+对糖苷酶活性有促进作用,而Fe³⁺、SDS和EDTA-Na2对其活性有明显的抑制作用。采用层析法对刺五加皂苷B及其酶解产物进行分析,结果表明,经纯化的糖苷酶对刺五加皂苷B的酶解转化效果显著,得到Rf值为0.32的产物;通过红外光谱、质谱手段对底物及产物的结构进行分析,根据结果推测,刺五加皂苷B经酶解作用可能水解掉C-28位糖链末端连接的α-1,4键的鼠李糖基,生成一种次生皂苷。对刺五加皂苷B及其酶解产物进行抗氧化活性分析,采用DPPH法和Fenton法进行测定,结果表明,酶解产生的次生皂苷与刺五加皂苷B相比,活性得到了一定的提高,可能与其结构发生改变有关。