论文部分内容阅读
高脂血症是一种全身的脂代谢异常[1],它是引发脂肪肝、动脉粥样硬化、冠心病、糖尿病等诸多疾病的重要因素。随着人们生活水平的提高,高脂血症的发病率在逐年上升,其已成为威胁人类健康的重大疾病之一。 目前临床上常用的降脂类西药,均有不同程度的毒副作用。中药因作用缓和,毒副作用较小,在高脂血症这一领域取得了较大的进展,然而,仍有许多中药降脂作用的物质基础和作用机理还不明确,卷柏就是其中之一。为了解其物质基础,本实验室前期,对卷柏化学成分进行了全面系统的研究,从中分离得到大量的黄酮类、木脂素类、核苷类和其他多酚类化合物成分[2-7]。实验室前期在采用去卵巢大鼠模型研究卷柏雌激素作用时,发现卷柏有降血脂的作用[8];在对四部位萃取法得到的卷柏水、正丁醇、乙酸乙酯及石油醚部位的降脂活性进行评价时,发现正丁醇部位降脂活性最佳[8]。但这种方法采用有机试剂进行分离,不利于工业化大生产。 考虑工艺要适合工业化大生产,本实验所研究的卷柏提取物的提取方法为:卷柏70%乙醇回流提取得到总部位,将总部位上聚酰胺柱,依次以水、50%乙醇、80%乙醇梯度洗脱,洗脱液减压浓缩、干燥得各洗脱部位。并选用HepG2细胞、去势大鼠、饮食诱导大鼠高血脂症三种模型,通过体外细胞筛选结合整体动物实验的方法,比较卷柏各部位的降脂作用,以期筛选出卷柏降脂活性部位。 目的:评价卷柏提取物不同部位的降脂活性,初步探讨其作用机理,为明确卷柏降脂作用的物质基础和作用机理奠定基础。 方法:首先观察卷柏70%乙醇提取物及其上聚酰胺柱所得水、50%乙醇、80%乙醇部位对HepG2细胞胆固醇含量的影响;同时结合整体动物实验的方法,比较卷柏醇提物及其上聚酰胺柱所得各部位对去势大鼠和饮食诱导大鼠高血脂症模型的降脂活性,并对其降脂的作用机理进行初步探讨。 结果:分为三部分(1)HepG2细胞胆固醇含量测定实验结果显示:HepG2细胞给药36小时后,卷柏80%乙醇部位能够显著降低细胞胆固醇的含量,总部位次之,水部位和50%乙醇部位作用不明显;(2)去势大鼠模型实验结果显示:卷柏提取物能改善去势大鼠由于卵巢切除引起的子宫萎缩、腹部脂肪堆积及血脂血糖升高的症状,维持子宫重量、减少腹部脂肪堆积并能降低血脂血糖水平,以卷柏总部位和卷柏80%乙醇部位组作用较明显;(3)饮食诱导高脂血症大鼠模型结果显示:卷柏提取物有降低血脂水平和抗氧化的作用,以卷柏80%乙醇部位组降低血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平和抗氧化的作用较明显。提示卷柏降脂的作用机理可能与卷柏的抗氧化能力有关。另,卷柏提取物组可显著降低血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和肝脏中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,升高肝脏中脂联素(APN)、极低密度脂蛋白(VLDL)水平。以卷柏总部位组和80%乙醇部位组作用较明显。 结论:细胞实验结合动物实验结果提示卷柏提取物有较好的降脂作用,其降脂的作用机理机理可能与卷柏的抗氧化能力有关。另,卷柏提取物对高脂血症大鼠肝脏有一定的调节,其减少脂肪在肝脏中积聚、改善肝脏脂肪变的作用可能与其提高肝脏中VLDL水平有关。卷柏总部位和卷柏80%乙醇部位组作用较为明显,而去势大鼠和饮食诱导高脂血症大鼠实验中,卷柏80%乙醇部位组用药量小于总部位组用药量,提示卷柏80%乙醇部位可能是其主要活性部位。