博尔纳病病毒对BALB/c小鼠感染性的研究

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博尔纳病病毒(Borna Disease Virus,BDV)是非分节段的单负链RNA病毒。BDV具有嗜神经性,可持续感染动物中枢神经系统。近年来,国内外一些研究者报道人类的神经精神疾病,如精神分裂症、慢性疲劳综合征、迟发型运动障碍等的发生可能与BDV的感染有关。 在实验条件下,BDV可以感染从啮齿类动物到非人类灵长类动物等几乎所有的温血动物,其中多种大鼠特别是Wistar大鼠和Lewis大鼠等常作为BDV感染的动物模型使用。目前报道仅有少数小鼠品系如MRL小鼠等对BDV感染敏感,可以作为动物模型使用。BALB/c小鼠感染BDV后的表现很轻微,有报道指出不同BDV病毒株可能对小鼠的感染性不同,有的野毒株不能感染新生或成年的小鼠。 为了确定BDV对BALB/c小鼠的体内外感染性及建立感染模型,本研究选择BDV H1766株作为研究对象,用滴度为2.0×107FFU/mL的BDV病毒液分别对新生和成年BALB/c小鼠进行脑内接种,并用相同滴度的病毒液对原代培养的新生BAILB/c小鼠神经细胞和BALB/c小鼠脑片进行接种。经过一定时间的病毒作用后,采用巢式RT-PCR检测接种BDV的BALB/c小鼠脑组织、原代神经细胞和小鼠脑片中BDV-p40基因,并通过原位杂交和免疫组化实验检测接种脑内和细胞中的BDV-p40基因和BDV-P40蛋白来确定BDV的感染情况。结果显示,体内接种病毒的新生和成年的BALB/c小鼠脑组织中均可以检测到BDV-p40基因和BDV-P40蛋白;接种病毒的原代培养的BALB/c小鼠神经细胞中可以检测到BDV-p40基因,但未检测到BDV-P40蛋白;原代培养的脑片中可以检测到BDV-p40基因。本研究证明了BDV H1766株对新生和成年的BALB/c小鼠、体外原代培养神经细胞和脑片的感染性,建立了体内、外研究模型,为进一步探讨BDV的发病机制,开发预防治疗新药物的研究奠定了基础。
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