免疫核糖核酸脂质体的制备及其免疫作用研究

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:limida
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免疫核糖核酸(iRNA)是一种新型免疫增强药物,在临床已经得到应用。但由于其自身性质不稳定,极易被降解,在应用中效果不佳,且价格昂贵。本课题致力于制备以十八烷胺(SA)为主要膜材的iRNA阳离子脂质体,以达到改变iRNA剂型,增强iRNA的免疫活性的目的。在制备iRNA-SA阳离子脂质体的过程中,首先采用正交实验法,确定经初步筛选的三种iRNA-SA阳离子脂质体膜材的最佳比例;并通过比较不同制备方法之间的包封率,选择最适合包裹iRNA的脂质体的制备方法。制备成功后,采用分光光度法和电泳法验证SA阳离子脂质体对iRNA的包裹效果,及iRNA-SA阳离子脂质体的稳定性。并分别利用ELISA法和流式细胞术测定给药后小鼠的体液免疫水平和细胞免疫水平,比较iRNA-SA脂质体和裸iRNA两种不同制剂的免疫活性,以确认SA阳离子脂质体对iRNA的免疫活性的影响。研究结果显示三种膜材的最佳配比为6:2:2,最适SA阳离子制备方法是薄膜法。并且iRNA-SA阳离子脂质体具有很高的包封率及稳定性,在体外能有效地保护iRNA。免疫试验结果表明,阳离子脂质体能够显著地提高iRNA对小鼠的细胞免疫和体液免疫功能。
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