纳米颗粒对肿瘤免疫逃逸影响的研究

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肿瘤免疫逃逸是当今世界研究比较广泛的课题。纳米颗粒以其低毒高效并能激活免疫系统的特性引起纳米医学工作者的高度关注。抗菌肽以其广泛的生物学效应,尤其是在抑瘤方面的表现同样引起人们的关注。本课题就C70纳米颗粒以及抗菌肽对肿瘤免疫逃逸相关基因的影响展开了研究,研究结果如下:1.采用流式细胞仪技术,我们对经纳米颗粒处理过的荷瘤鼠脾脏淋巴细胞进行了分析,结果显示,经C70-COOH纳米颗粒处理后,小鼠脾脏淋巴细胞CD4+T细胞的比例(29.6%)显著高于生理盐水处理组(23.5%)和对照组(23.38%)(P<0.05)。说明纳米颗粒抑瘤的途径是通过提高CD4+型T细胞的比例来实现的。2.通过检测小鼠不同组织的FOXP3基因表达,发现FOXP3基因在脾脏和胸腺组织中均有表达,而在心脏,肝脏,肺脏,肾脏组织中并不表达,进一步验证了FOXP3基因是Treg细胞的特异性表达基因。通过检测荷瘤鼠出瘤的不同时间点FOXP3基因表达量的变化,发现荷瘤鼠的脾脏淋巴细胞中的FOXP3基因随着种瘤天数的延长,表达量上升。说明,随着机体肿瘤的增长,脾脏中的Treg细胞比例亦有提高,增加了肿瘤免疫逃逸的机率。3.液氮研磨比用剪碎匀浆的RNA提取效果要好。液氮研磨以后加入Trizol,使研磨的粉末迅速的固化,等到固态的研磨混合物稍微溶解,再快速的研磨,直至匀浆状的混合物变成清凉的粉红色液体。这种提取方法最大程度的降低了RNA酶的污染,有效的抑制了组织内源性RNA酶的活性,能够很好的保护RNA不被降解。4.利用MTT方法,我们找到了C70纳米颗粒以及抗菌肽对B16细胞以及RAW细胞的无毒上限的浓度。经过此浓度下的药物处理,我们用RT-PCR以及Real-timePCR的技术对免疫逃逸相关基因进行检测,结果发现,C70-COOH纳米颗粒可以上调RAW细胞的Fasl表达量,同时,也上调了B16细胞的Fas表达量。说明,C70-COOH可以提高巨噬细胞对肿瘤细胞的免疫能力,能够有效的抑制肿瘤细胞的免疫逃逸作用。抗菌肽处理B16和RAW细胞后,其Fas,Fasl基因的表达量均有显著提高,说明抗菌肽的抑瘤机制可能与Fas/Fasl介导的肿瘤凋亡途径无关。具体的更深层次的机理需要我们进一步的研究。
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