FLT3-ITD与NPM1基因突变在血液肿瘤中的表达及意义

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目的:探讨正常核型的急性髓细胞白血病(NK-AML)和骨髓增生异常综合征(MDS)中FLT3-ITD和NPM1基因突变的发生率及各亚型之间的差别,同时观察伴有上述两种基因突变的初诊急性髓细胞白血病患者的完全缓解(CR)率及临床特点。方法:回顾性分析2008年1月至2010年10月期间河北省人民医院收治的初诊201例AML和MDS患者的临床资料,其中初诊的125例AML为正常核型患者(包括存在t(15,17)和t(8,21)的M2和M3患者)(男64例,女61例),MDS 76例(男42例,女34例),提取上述患者骨髓单个核细胞DNA,采用基因组DNA-PCR及基因直接测序方法检测所有患者FLT3基因外显子14、15中ITD突变及NPM1基因第12号外显子突变。融合基因检测包括PML/RARa和AML1-ETO。结果:1在初诊125例NK-AML中, NPM1基因突变例数为57例,分别为:M1 2例(28.6%),M2 12例(38.7%),M4 12例(60%),M5a 14例(66.7%),M5b 17例(73.9%),M3 20例、M4E_O 3例中未见NPM1基因突变的表达,NPM1基因突变在初诊的125例NK-AML患者中的总表达率为45.6%; FLT3-ITD基因突变例数为50例,分别为:M11例(14.3%),M2 6例(19.4%),M3 16例(80%),M4 8例(40%),M5a 9例(42.9%),M5b 10例(43.5%),M4E_O中未见FLT3-ITD基因突变的表达,FLT3-ITD基因突变在初诊的125例NK-AML患者中的总表达率为40%;125例患者中NPM1~+/FLT3-ITD~-占23例(18.4%),NPM1~-/FLT3-ITD~-占39例(31.2%),NPM1~+/FLT3-ITD~+占45例(36.0%),NPM1~-/FLT3-ITD~+占18例(14.4%);有85例AML患者经1疗程化疗后达CR,CR率为68%,其余40例患者经1个疗程化疗后未达CR,未达CR的患者有45例,其中8例为NPM1~+/FLT3-ITD~+,15例为NPM1~-/FLT3-ITD~-,17例为NPM1-/FLT3-ITD~+的患者,继续进行第2疗程化疗后,45例中有29例达CR,余11例仍未达CR,此11例为NPM1~-/FLT3-ITD~+的患者,第2疗程化疗后的总CR率为91.2%。23例NPM1~+/FLT3-ITD~-的患者经1疗程后均达CR,其达CR所需时间为15±5天,39例NPM1~-/FLT3-ITD~-达CR所需时间21±10天,45例NPM1~+/FLT3-ITD~+达CR所需时间23±9天,7例NPM1~-/FLT3-ITD~+达CR所需时间40±18天;57例NPM1突变阳性的患者女性占34例(59.6%),男性占23例(40.4%),且均表现为骨髓原始细胞比例、外周血白细胞及血小板计数较高,无一例全血细胞减少,骨髓通常为有核细胞增生明显活跃,50例FLT3-ITD突变阳性的患者女性占27例(54.0%),男性占23例(46.0%),普遍表现为骨髓原始细胞比例、外周血白细胞计数及血小板计数较高,其中3例为全血细胞减少,骨髓通常为有核细胞增生明显活跃。2 76例MDS患者中大部分存在染色体的改变,其中7例为del(5q),15例为+7,13例为del(8),10例为del(20q),8例为核型正常患者,其余23例为复杂核型患者。NPM1基因突变均累及5号染色体,其NPM1突变情况为:RARS 1例(1.3%),RAEB-1 5例(6.6%),RAEB-2 1例(1.3%),其他亚型中未见NPM1基因突变的表达,NPM1基因突变在MDS总的表达率为9.2%;FLT3-ITD基因突变的表达情况为:RAEB-1 2例(2.6%),RAEB-2 4例(5.3%),其他亚型中未见FLT3-ITD基因突变的表达,FLT3-ITD基因突变在MDS总的表达率为7.9%;其中有5例RAEB-1为NPM1~+/FLT3-ITD~-,2例RAEB-1和1例RAEB-2为NPM1~+/FLT3-ITD~+,4例RAEB-2为NPM1~-/FLT3-ITD~+,15例RAEB-1和18例RAEB-2为NPM1~-/FLT3-ITD~-;NPM1~+/FLT3-ITD~+的1例RAEB-1和1例RAEB-2均在1月内转化成AML。3 10例免疫性血小板减少症、10例再生障碍性贫血、10例多发性骨髓瘤、10例非霍奇金淋巴瘤、10例急性淋巴细胞白血病、10例巨幼细胞贫血中均未检测到FLT3-ITD及NPM1突变;4 16例FLT3-ITD突变阳性的M3患者中均检测到PML/RARa表达,6例FLT3-ITD突变阳性的M2患者中有5例检测到ETO表达,而57例NPM1突变阳性的患者中未检测到特异性融合基因表达。结论:1 NPM1突变的发生率在初诊的AML各亚型中具有异质性,各亚型由低到高为M1<M2<M4<M5a<M5b,但各亚型之间无统计学意义。FLT3-ITD突变的发生率在初诊的AML各亚型中也具有异质性,可见除M4E_O外的所有亚型中,各型突变率由低到高为M1<M2<M4<M5a<M5b<M3,其中M3组FLT3-ITD基因突变的发生率高于其它类型组。2在MDS各亚型中NPM1突变多见于RAEB-1,FLT3-ITD突变多见于RAEB-2。3 NPM1突变及FLT3-ITD突变在女性患者多见,骨髓原始细胞比例、外周血白细胞及血小板计数均较高。4 NPM1~+/FLT3-ITD~-组达到CR时间最短,缓解率最高,NPM1~-/FLT3-ITD~+组达到CR时间最长,缓解率最低。
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