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目的研究黄芪甲苷(Astragaloside IV,ASIV)对大鼠心肌纤维化的作用,并观察其中TGF-β1 Smad/NF-κB信号通路的变化。方法在体实验:随机将40只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠分为4组,每组10只:空白组、ISO(异丙肾上腺素,isoproterenol)组(ISO 10 mg?kg-1?d-1,i.p.)、PRO组(ISO 10 mg?kg-1?d-1,i.p.;PRO 40 mg?kg-1?d-1,i.g.)、ASIV组(ISO 10mg?kg-1?d-1,i.p.;ASIV 40 mg?kg-1?d-1,i.g.)。持续注射ISO 30天,同时分别给予PRO、ASIV。分别测量大鼠全心质量指数(Heart mass index,HMI)和左心室质量指数(Left ventricle mass index,LVMI);采用天狼星红染色观察大鼠心脏中的胶原沉积状态;用免疫组化法测定大鼠心脏中TGF-β1、TNF-α的表达;用ELISA法测定血清中Ⅰ型前胶原羧基端前肽(procollagen I carboxyterminal propeptide,PICP)及其抑制物Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(carboxyterminal telopeptide of type I collagen,ICTP);利用western blot检测TGF-β1、Smad2/3、Smad4、Smad7、TNF-α、p65、TLR4的蛋白表达;利用PCR法测定肌动蛋白α(α-SMA)、I型胶原、III型胶原RNA含量表达。离体实验:原代培养大鼠乳鼠的心肌成纤维细胞。待传代至3代之后将心肌成纤维细胞随机分为4组:空白组、TGF-β1组(10μg/L)、PRO组(TGF-β1 10μg/L;PRO 2μM)、ASIV组(TGF-β1 10μg/L;ASIV 100μM)。PRO、ASIV处理心肌成纤维细胞2 h后,以10μg/L的浓度在细胞中加入TGF-β1作用24 h。MTT法检测心肌成纤维细胞活性;western blot检测Smad2/3、Smad4、Smad7、TNF-α、p65、TLR4的蛋白表达。结果在体实验中,与空白组相比,利用ISO造模后,(1)大鼠心脏的HMI、LVMI增加;(2)大鼠心脏组织中胶原纤维聚集增加;(3)大鼠血清中的PICP、ICTP含量增加;(4)大鼠心脏组织中TGF-β1、Smad2/3、Smad4、TNF-α、p65、TLR4蛋白表达增加,而Smad7蛋白表达降低;(5)大鼠心脏组织中α-SMA、I型胶原、III型胶原的RNA表达增加,且III型胶原的增加较I型胶原快。与ISO组相比,ASIV组(1)大鼠心脏的HMI和LVMI降低;(2)大鼠心脏组织中胶原纤维聚集降低;(3)大鼠血清中的PICP、ICTP含量均有所降低;(4)大鼠心脏组织TGF-β1、Smad2/3、Smad4、TNF-α、p65、TLR4蛋白表达降低,而Smad7蛋白表达增加;(5)大鼠心脏组织中的α-SMA、I型胶原、III型胶原的RNA表达降低,且I型胶原与III型胶原的比值增加。离体实验中,与空白组相比,加入TGF-β1后,(1)大鼠乳鼠心肌成纤维细胞增殖;(2)大鼠乳鼠心肌成纤维细胞中Smad2/3、Smad4、TNF-α、p65、TLR4蛋白表达增加,而Smad7蛋白表达降低。与TGF-β1组相比,ASIV组(1)大鼠乳鼠心肌成纤维细胞增殖减缓;(2)大鼠乳鼠心肌成纤维细胞中Smad2/3、Smad4、TNF-α、p65、TLR4蛋白表达降低,而Smad7蛋白表达增加。结论黄芪甲苷对大鼠心肌纤维化有保护作用,可能与黄芪甲苷能够抑制TGF-β1Smad/NF-κB通路有关。