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蒲黄为香蒲科植物水烛香蒲Typha angustifolia L.、东方香蒲Typha orientalis Presl.或同属植物的干燥花粉。主产于江苏、浙江、江西、广东、云南、台湾等地区。其味甘,性平。归肝,心包经。主治:止血、化瘀、通淋。用于吐血、衄血、咯血、崩漏、外伤出血、经闭痛经、脘腹刺痛、跌打肿痛、血淋涩痛。本实验中,将干燥的蒲黄用甲醇回流提取3次,提取物用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取,得各萃取物。综合运用硅胶柱色谱、反相硅胶柱色谱、薄层层析、中压制备色谱仪等方法,从乙酸乙酯部位和正丁醇部位中分离得到22个单体化合物。根据理化性质与波谱数据(NMR,MS等)分析鉴定化合物结构。其中黄酮类7个,生物碱类4个,脂肪酸甘油酯类4个,甾类3个,长链醇类2个,羧酸类2个。分别为:5,10-三十二烷二醇(1),4-三十三烷醇(2),柚皮素(3),油酸(4),山奈酚(5),槲皮素(6),油酸甘油酯(7),二十烷酸甘油三酯(8),胡萝卜苷-6’-十二烷酸酯(9),棕榈酸甘油酯(10),1,3-油酸甘油二酯(11),香草酸(12),胡萝卜苷(13),胡萝卜苷-6’-亚油酸酯(14),1-O-(β-D-葡萄糖基)-(2S,3R,4E,13Z)-2-[(2’R)-2’-羟基十九烷醇氨基]-4,13-二烯十九烷-3-二醇(15),水仙苷(16),尿嘧啶核苷(17),Zarzissine(18),6-氨基嘌呤核苷(19),异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷(20),香蒲新苷(21),槲皮素-3-O-(2G-α-L-鼠李糖基)-芸香糖苷(22)。其中化合物1、2、4、7、8、9、11、14、17和19等10个化合物为首次从蒲黄中分离得到。以脂多糖LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞释放NO。将分离得到的化合物配制成6.25 μM、12.5 μM、25 μM和50μM四个不同的浓度,以紫铆因(Butein)作阳性对照,Griess反应后测定吸光度。检测药物对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞释放NO的抑制作用。结果表明化合物1、2、3、5、6、7、9、10、11、12、16、17、18、19、20和21等16个化合物对NO的释放表现出较强的抑制活性且呈现浓度依赖性,其IC50值均低于50 μM。建立了以高效液相同时测定香蒲新苷、异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷和水仙苷含量的方法。采用LaChrom C18(4.6 mm×25 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.05%磷酸水溶液(15:85)为流动相,检测波长为254 nm,流速为1 ml/min,柱温为30℃,进样量为10 μ1。结果表明系统适应性达到标准,三种化合物线性良好,精确性、重现性、加样回收率试验结果符合规定。测定结果表明蒲黄中香蒲新苷和异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷含量之和为0.770%,明显高于药典规定。用甲醇提取,气流吹扫-微注射器萃取技术(GP-MSE)得到蒲黄的挥发性成分,用气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析并鉴定其化学成分,归一化法测定相对含量。从蒲黄中检出101个峰,鉴定出68个化合物,占挥发油总量的96.89%。其中亚油酸含量最高,达32.01%;棕榈酸甲酯、棕榈酸、亚油酸甲酯、油酸甲酯、(Z)-9-十四碳烯醛和十八烷酸的含量均高于2%,为蒲黄主要挥发性成分。分析结果发现,蒲黄所含挥发性成分以长链脂肪酸及其简单酯为主,其次为长链烷烃与长链醇,除此之外,蒲黄挥发性成分中还含有少量生物碱。